バイオ研究のススメ：第二部

　第一部で基本を学んだら、この第二部から実際に実験をやってみましょう！研究の内容によって使用する実験法が異なるはずです。自分がこれから行う実験法から覗いていってください。九歯大の大学院生は生理学分野の講義を受講してくれれば、Moodleでより詳細な解説が見れます。

第一部：研究を始める前に知っておこう！
第二部：さあ、実験をやってみよう！
第三部：研究をまとめよう！
★マークのコンテンツは「必見！」です。
＊マナビ研究室に関してはコチラを参照。

① 顕微鏡の使い方

　　位相差顕微鏡
　　┗ ● 09 生物物理学 光学顕微鏡・位相差顕微鏡
　　┗ ● 実験：位相差顕微鏡観察でなにがみえるの？
　　蛍光顕微鏡
　　┗ ● 顕微鏡を学ぶ | オリンパス ライフサイエンス
　　ハロゲンランプの取り換え方
　　┗ ● 

② 細胞培養

　　初代培養細胞
　　┗ ● 
　　Cell-line（購入・MTA）
　　┗ ● 
　　血清の調整
　　┗ ● 
　　培養液の作製
　　┗ ● 
　　細胞継代方法
　　┗ ● 
　　細胞の保存
　　┗ ● 

③ 組織の採取

　　化学固定（灌流）
　　┗ ● 
　　神経系組織の採取（脳・末梢神経節）
　　┗ ● 
　　口唇、咽喉頭、舌、歯・歯槽骨
　　┗ ● 
　　内臓
　　┗ ● 

④ パラフィン切片作製法

　　包埋
　　┗ ● 
　　切片作製
　　┗ ● 
　　貼り付け
　　┗ ● 
　　HE染色
　　┗ ● 

⑤ PCR法

　　原理
　　┗ ★ PCRの原理について（マナビ研究室）
　　DNA/RNA抽出法
　　┗ ● 
　　Primer設計・注文
　　┗ ● 
　　アガロースゲル電気泳動法
　　┗ ● 
　　ジェノタイピング
　　┗ ● 

⑥薬物投与法

　　┗ ● マイクロシリンジの洗浄方法

⑦ 凍結切片作製法（ミクロトーム・クリオスタット）

⑧ 免疫染色法

　　原理（マナビ研究室）
　　┗ ★ 免疫組織化学とは？
　　┗ ★ ポリクローナル抗体
　　┗ ★ モノクローナル抗体
　　実際の手順
　　┗ ● 

⑨ タンパク抽出法・定量法

　　原理
　　┗ ● 
　　各種方法
　　┗ ● 

⑩ ウエスタンブロッティング法

　　原理
　　┗ ● 
　　各種方法
　　┗ ● 

⑪ ELISA

　　原理
　　┗ ● 
　　各種方法
　　┗ ● 
　　標準曲線（エクセル）
　　┗ ● 

⑫ in situ hybridization法

　　原理
　　┗ ● 
　　実際の手順
　　┗ ● 

⑬ パッチクランプ法

　　原理
　　┗ ★ パッチクランプ法の原理と実際 - 日本生理学会（PDF）
　　┗ ● パッチクランプ法による細胞膜電流の測定（PDF）
　　┗ ● 電気生理学: パッチクランプ法
　　┗ ● 電気から見る生理学 〜6. パッチクランプ法〜
　　┗ ● 電気から見る生理学 〜7. パッチクランプアンプの中身〜
　　電極の作製
　　┗ ● 
　　実験溶液
　　┗ ● 
　　各種記録法
　　┗ ● 単離細胞からの記録
　　┗ ● スライスパッチクランプ法（PDF）
　　　　┗ ● 脳スライスの作成方法
　　┗ ● In vivoパッチクランプ法 | 兵庫医科大学 神経生理部門
　　記録手順
　　┗ ● 
　　データの解析
　　┗ ● 

⑭ その他の電気生理学実験

　　標本からの細胞外記録法
　　┗ ● 
　　in vivo細胞外記録法
　　┗ ● 神経
　　┗ ● 筋肉

⑮ カルシウムイメージング

　　ニューロンからの記録
　　┗ ● 
　　唾液腺細胞からの記録
　　┗ ● 
　　培養細胞からの記録
　　┗ ● 
　　解析法
　　┗ ● 

⑯ 組織内細菌数計測

　　寒天培地（BHI）でのコロニー数計測
　　┗ ● 
　　PCRによる細菌量の定量
　　┗ ● 

⑰ 血液分析

　　血球数解析
　　┗ ● 
　　血糖値測定
　　┗ ● 
　　ホルモン量解析
　　┗ ⇒ ⑪ELISA法を参照

⑱細胞種の分配法

　　FACS
　　┗ ● 
　　マグネットビーズ細胞採取
　　┗ ● 

⑲遺伝子組換動物

　　作製法（マナビ研究室）
　　┗ ★ 遺伝子組換動物のつくり方（その１）
　　┗ ★ 遺伝子組換動物のつくり方（その２）
　　飼育法
　　┗ ● バッククロス

⑳遺伝子編集

　　原理と応用（マナビ研究室）
　　┗ ★ CRISPR-Cas9の原理
　　┗ ★ CRISPR-Cas9のマルチな活用法

第一部：研究を始める前に知っておこう！
第二部：さあ、実験をやってみよう！
第三部：研究をまとめよう！
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