Th2免疫チェックポイント阻害！？新たなガン免疫療法へ

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タイトル
Cancer immunotherapy via targeted TGF-β signalling blockade in TH cells
『TGF-βシグナル阻害を標的としたガン免疫療法』
https://www.nature.com/articles/s41586-020-2850-3

【感想】
TGF-βシグナルがCD4陽性T細胞に対してTh1,Th2分化を抑制していることが
昨日の論文紹介（https://note.com/kensho1007/n/nf18626c81e01）で理解した。さらに本論文では研究を発展させ、ガン免疫治療を目指して抗体エンジニアリング技術を駆使しCD4陽性T細胞選択的にTGF-βシグナルの抑制する抗体開発を目指した。

一連の抗体エンジニアリング（精製確認、結合能評価、Fc部位へのTRAP化合物付加など）は大変勉強になるものばかりだった。
この抗体の表現型は、遺伝学的にCD4陽性T細胞でTGF-β受容体を欠損させた
マウスと比較しても遜色のない結果で気持ちがいい。
疑問としては、昨日同様のPyMTマウス（乳がんモデルマウス）とM38 cellのガン種でしか検討がなかったので他のガン種に対してはどうなのだろうか。

臨床研究に発展していくのが楽しみな一方で、ヒトでも効くのかは大きな課題だろう。また免疫チェックポイント阻害との相性や耐性獲得へのケアはどのように発展していくのかも楽しみだ。
いつか免疫チェックポイント阻害薬に加え、TGF-βシグナル阻害がTh2免疫チェックポイント阻害薬？としてガン細胞をやっつける新たな治療戦略になりうるのだろうか。

【概要】
Cre誘導(CreER)によるCD4陽性T細胞でのTGF-β受容体欠損
これらは全て20/10/23紹介論文と同様の結果で、
D4陽性T細胞でのTGF-β受容体欠損により、
ガン細胞では低酸素状態と細胞死が誘導された。
TGF-β suppresses type 2 immunity to cancer
『TGF-βシグナルはガンへのTh2免疫を抑制している』
https://note.com/kensho1007/n/nf18626c81e01

CD4陽性T細胞で選択的にTGF-βをTRAPする
a CD4 TGF-β Trap (4T-Trap) ；anti-CD4: Fc-R2ECDを開発した。
具体的には抗体がCD4認識し結合すると、Fc領域に付けたTGF-β受容体2の細胞外ドメイン（ECD）がTGF-βをトラップしてくれるという仕組みだ。
ただ、マウスCD4はhCD4と当然異なるので、hCD4化した遺伝子改変マウス（CD4 mice）で以降の実験を行う。

CD4 PyMT miceへの4T-Trapの抗腫瘍効果
hCD4化した乳がんモデルマウスに4T-Trap抗体を6週に渡って、1週間に二回静脈内投与するプロトコルで実験を行った。
乳がんが少し成長(5x5 mm or 9x9 mm)したところからこのプロトコルで投与すると
見事に乳がんの成長が抑制される。
遺伝学的にTGF-βシグナルを阻害したCd4-creERT2;Tgfbr2fl/fl PyMTマウスと同様に
腫瘍組織内の血管構造がリモデリングされていた。

丁寧なタイムコースの検討は4T-Trapの作用メカニズムの一端を教えてくれる
・1-2週間では変化なし（4群間）
・3-4週間でまずCD31がまばらではなくなり（CD31染色が構造的に）、ガン細胞HPPが激増する。（4T-Trapでのみ）
・5-6週間でガン細胞死（CC3）が激増ぃ、HPPが微増する（4T-Trapでのみ）。
他の3群では孤立したCD31がどんどん増えていく。

4T-Trap とVEGF-Trap Fcを組み合わせた治療
低酸素状態におけるVEGFAシグナルの誘導は、血管新生を促進し低酸素状態に適応しようとする。実際に、4T-Trapによってガン細胞において低酸素状態が誘導されるとVEGFAシグナルが高まっていた。こうしたガン細胞の適応耐性に対してVEGFをトラップするためVEGF-Trap Fc を生み出した。これはマウスのIgG2a Fc領域にVEGF受容体フラグメントをくっつけたTRAP抗体である。
4T-Trap とVEGF-Trap Fcの共投与により、
・4T-Trap単独でみられる血管リモデリングが減弱（CD31染色が消失）。
・4T-Trap単独よりガン細胞死が高まる（CC3発現増大）
・4T-Trap単独より抗腫瘍効果が増大し生存率も向上する