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書記の読書記録2024.4.8『細胞培養入門ノート (無敵のバイオテクニカルシリーズ)』

井出 利憲田原 栄俊『細胞培養入門ノート (無敵のバイオテクニカルシリーズ)』のレビュー


レビュー

器具の使い方や無菌操作などの細胞培養の基本的な手技について,実習形式でまとめた教科書。細胞実験をやる研究室配属された時にまず読むべき本の一つで,やや内容は古いが現在でも十分通じるところが多い。


もくじ

事前講義 細胞培養の基礎知識を学ぼう!

講義1● 細胞培養とは

講義2● 培養細胞の種類と特徴

1 細胞の一般的な性質

2 代表的な培養細胞

講義3●細胞培養でよく使う試薬や器具

講義4● 培養室の見学

1 培養室の意義

2 培養室へ入る前の注意

3 まず前室へ入る

4 無菌室へ入る

解説

第1日 無菌操作の基本を身につけよう!

実習1● 培地替え

解説

第2日 継代の方法と細胞数の計測法を身につけよう!

実習1● 細胞の継代

1 継代を行う前に知っておくべきこと

2 無菌室へ入る前に準備しておくこと

実習2● 細胞を数える

実習2-1裸核にして細胞を数える

実習2-2裸核にしないで数える

実習2-3ディッシュに付着したままの細胞を数える

解説

第3日 正確な細胞数をまく技術を身につけよう!

実習1● 細胞浮遊液の正確な分注

1 実験前に考えておくべきこと

2 正確な分注のしかた

実習2● 少数細胞のまき込みによるコロニー形成

実習3● コロニーのギムザ染色

解説

第4日 マルチウェルプレートの扱いとクローニングの方法を学ぼう!

実習1● マルチウェルプレートにまく

実習2● 細胞のクローニング

解説

第5日 増殖曲線の作成と応用実習にチャレンジしよう!

実習1● 増殖曲線を描く

1 実験操作で注意すべきこと

2 増殖曲線の描き方

実習2● 応用実習

実習2-0実験材料となる細胞の準備

実習2-1免疫染色

実習2-2細胞への遺伝子導入(トランスフェクション)

実習2-3放射性同位元素で標識する

解説

特別実習 細胞培養に必要な準備を学ぼう!

実習1● 培養室のメンテナンス

実習1-1培養室の掃除

実習1-2インキュベーターの掃除

実習1-3炭酸ガスボンベの交換

実習2● 器具・試薬の滅菌

実習2-1オートクレーブ

実習2-2乾熱滅菌

実習2-3濾過滅菌

実習2-4ガラスピペットの洗浄と滅菌

実習3● 共通試薬の調製

実習3-1培地を作る

実習3-2血清を非動化する

実習3-3トリプシン/EDTAを作る

実習3-4血清のロットチェック

実習4● 細胞の管理

実習4-1細胞を凍結保存する

実習4-2細胞を解凍する

実習4-3マイコプラズマの検出

● 特別実習を通じて

解説


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