書記の読書記録2024.4.8『細胞培養入門ノート (無敵のバイオテクニカルシリーズ)』
井出 利憲,田原 栄俊『細胞培養入門ノート (無敵のバイオテクニカルシリーズ)』のレビュー
レビュー
器具の使い方や無菌操作などの細胞培養の基本的な手技について,実習形式でまとめた教科書。細胞実験をやる研究室配属された時にまず読むべき本の一つで,やや内容は古いが現在でも十分通じるところが多い。
もくじ
事前講義 細胞培養の基礎知識を学ぼう!
講義1● 細胞培養とは
講義2● 培養細胞の種類と特徴
1 細胞の一般的な性質
2 代表的な培養細胞
講義3●細胞培養でよく使う試薬や器具
講義4● 培養室の見学
1 培養室の意義
2 培養室へ入る前の注意
3 まず前室へ入る
4 無菌室へ入る
解説
第1日 無菌操作の基本を身につけよう!
実習1● 培地替え
解説
第2日 継代の方法と細胞数の計測法を身につけよう!
実習1● 細胞の継代
1 継代を行う前に知っておくべきこと
2 無菌室へ入る前に準備しておくこと
実習2● 細胞を数える
実習2-1裸核にして細胞を数える
実習2-2裸核にしないで数える
実習2-3ディッシュに付着したままの細胞を数える
解説
第3日 正確な細胞数をまく技術を身につけよう!
実習1● 細胞浮遊液の正確な分注
1 実験前に考えておくべきこと
2 正確な分注のしかた
実習2● 少数細胞のまき込みによるコロニー形成
実習3● コロニーのギムザ染色
解説
第4日 マルチウェルプレートの扱いとクローニングの方法を学ぼう!
実習1● マルチウェルプレートにまく
実習2● 細胞のクローニング
解説
第5日 増殖曲線の作成と応用実習にチャレンジしよう!
実習1● 増殖曲線を描く
1 実験操作で注意すべきこと
2 増殖曲線の描き方
実習2● 応用実習
実習2-0実験材料となる細胞の準備
実習2-1免疫染色
実習2-2細胞への遺伝子導入(トランスフェクション)
実習2-3放射性同位元素で標識する
解説
特別実習 細胞培養に必要な準備を学ぼう!
実習1● 培養室のメンテナンス
実習1-1培養室の掃除
実習1-2インキュベーターの掃除
実習1-3炭酸ガスボンベの交換
実習2● 器具・試薬の滅菌
実習2-1オートクレーブ
実習2-2乾熱滅菌
実習2-3濾過滅菌
実習2-4ガラスピペットの洗浄と滅菌
実習3● 共通試薬の調製
実習3-1培地を作る
実習3-2血清を非動化する
実習3-3トリプシン/EDTAを作る
実習3-4血清のロットチェック
実習4● 細胞の管理
実習4-1細胞を凍結保存する
実習4-2細胞を解凍する
実習4-3マイコプラズマの検出
● 特別実習を通じて
解説
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