高血圧症における口腔内細菌叢と口腔・腸内細菌伝播の役割

先端研究ジャーナル
第43巻 2023年1月号 147-161ページ
原著論文
高血圧症における口腔内細菌叢と口腔・腸内細菌伝播の役割
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https://doi.org/10.1016/j.jare.2022.03.007
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ハイライト

本研究は、口腔内細菌叢と高血圧症との強い関連性を支持する包括的な証拠を提供した。高血圧患者において、14種類の唾液腺細菌と15種類の歯肉縁下細菌が有意に変化していることが明らかになった。

口腔内の 15 種の細菌が血圧と関連することが初めて明らかになった。また、口腔内細菌叢と他の臨床パラメータとの間に新たな関連性が見出された。

本研究では、唾液、歯肉縁下プラーク、糞便に共存する共有属を同定し、口腔と腸のサンプルタイプ間の共有属の関連性を図示した。

本研究は、高血圧症における重要な口腔-腸管感染性微生物の同定を行った。口腔-腸管伝達微生物として 5 属 16 種が同定された。特に、Veillonella は、高血圧患者において安定的に濃縮される頻度の高い経口腸管伝達物質であることが確認され た。

高血圧患者の唾液がアンジオテンシン II 誘発高血圧を増悪させるという、口腔内細菌感染と高血圧の因果関係を明らかにした。また、Veillonellaはヒトの唾液を摂取したすべてのマウスの腸内に定着し、高血圧患者の唾液を摂取したマウスではより濃縮された。

概要
はじめに
歯周炎（PD）と高血圧（HTN）の関連はかなり証明されているが、この関連の背後にある性質は不明である。歯周炎を引き起こす口腔内細菌叢の異常は、様々な体系的疾患を悪化させることが知られているが、高血圧症における口腔内細菌叢の変化とその血圧への影響については、まだ解明されていない。

目的
HTNにおける口腔内および腸内細菌叢の変化とその役割を明らかにすること。

方法
我々は、横断研究（HTN患者95名、対照者39名）および6ヶ月間の追跡研究（HTN患者52名、対照者26名）を行い、HTNにおける口腔内および腸内細菌叢の役割を分析した。唾液、歯肉縁下プラーク、および糞便を採取し、16S rRNA遺伝子配列決定またはメタゲノム解析に供した。C57BL/6Jマウスを抗生物質で前処理して腸内細菌叢を枯渇させた後、ヒト唾液を経口投与して、口腔-腸内細菌伝播の異常がHTNに及ぼす影響を検証した。

結果
PDを有する参加者の血圧は、横断的コホートおよび追跡調査コホートのいずれにおいても、PDを有しない参加者に比べて高かった。唾液腺14属、歯肉縁下15属、腸内10属の相対量がHTNで有意に変化し、唾液腺7属、歯肉縁下12属、腸内6属の相対量が血圧と有意に相関していた。口腔-腸管伝達物質として5属16種が同定され、HTNにおける口腔-腸管間の微生物伝達の存在が示された。Veillonellaは、横断的コホートおよび追跡調査コホートの両方で、HTN参加者に安定的に濃縮された頻繁な口腔腸管伝達物質であった。高血圧患者からの唾液は、高血圧マウスの血圧を上昇させた。ヒト唾液由来のVeillonellaはマウス腸管に定着し、高血圧条件下でより多く定着した。

結論
PDおよび口腔内細菌叢は高血圧と強く関連しており、おそらく口腔-腸管間の微生物伝達を介している。唾液由来のVeillonellaが腸内に異所性にコロニーを形成することは、高血圧を悪化させる可能性がある。したがって、口腔内細菌叢および／または口腔-腸管間の微生物伝播を正確に操作することは、より良い高血圧の予防および治療のための有用な戦略である可能性がある。

図解抄録

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キーワード
口腔内細菌叢腸内細菌叢口腔腸軸血圧高血圧症小腸菌群
略語
高血圧症PD歯周炎BP血圧SBP収縮期血圧DBP拡張期血圧PCoAP主座標分析LEFSe線形判別分析効果サイズIL-6インターロイキン-6SNV一塩基変異ABX抗生物質カクテルANG IIアンジオテンシンIICRPC反応性蛋白質
はじめに
世界的な公衆衛生上の懸念として、高血圧（HTN）は心血管疾患の重要な危険因子であり、世界中で全死因の罹患率と死亡率を増加させる[1]。疫学及び病態生理学の研究において多くの努力が払われてきたが、高血圧の病因は依然として複雑である[2]。蓄積された証拠により、腸内細菌叢は、高血圧の発症および進行に関与する重要な環境因子であることが示されています[3]。しかし、口腔は人体で2番目に大きな微生物生息地であるにもかかわらず、他の微生物叢、例えば口腔微生物叢がHTNに関与しているかどうかは、あまり明らかではありません[4]。

実際、口腔内微生物の異常と密接に関連する一般的な歯周病である歯周炎（PD）とHTNの関連は確立されているものの、HTNにおける口腔内微生物の機能についてはほとんど分かっていません。横断的研究により、PD患者は血圧（BP）が高く、通常、より重症のPD患者でより高い血圧上昇が起こることが証明されています[5]。PDの歯周集中治療は、無作為化比較試験において、コントロール歯周治療よりも効果的にBPを低下させることが示されている[6]。興味深いことに、血圧の低下は、歯周病状態の改善の重要な指標である歯周ポケットの深さの減少と相関しており、PDとHTNとの因果関係を示唆しています[6]。口腔内細菌叢の異常は、歯周支持組織を蝕むことでPDを引き起こすだけでなく、全身疾患にも悪影響を及ぼすことが示唆されるようになってきた[7]。高齢女性を対象とした研究では、口腔内細菌叢とBPの関連が示唆されています[8]。しかし、高血圧症における口腔内細菌叢の異常の機能については、まだ十分に理解されていない。

系統的な疾患における口腔-腸管間の微生物伝播の重要性がますます認識されてきています。口腔微生物が腸に移動することは、生理的分離のため稀であると考えられていた従来の見解とは異なり、最近のデータでは、口腔微生物が腸に移動しコロニー化することは一般的かつ広範囲であり、口腔は腸内細菌叢の内在性リザーバーであると考えられています[9]。さらに、口腔内微生物の腸内異所性コロニー形成の上昇は、肝硬変[10]、関節リウマチ[11]、炎症性腸疾患[12]、アルツハイマー病[13]、さらにはコロナウイルス病2019など、様々な病態と関連していると言われています[14]。しかし、口腔-腸管間の微生物感染がHTNに関与しているかどうかは不明です。

本研究では、HTNにおける口腔・腸内細菌叢および口腔・腸内細菌伝播の機能を探索することを目的としました。まず、横断的コホートおよび追跡調査コホートにおいて、PDとHTNの関係を調査した。また、横断コホートにおいて、16S rRNA遺伝子配列を用いた口腔・腸内細菌叢の変化を調べ、口腔・腸内細菌叢と血圧・その他の臨床パラメータとの相関を探り、口腔・腸内細菌叢間のコミュニケーションを属レベルで調査した。さらに、メタゲノム解析により本コホートの口腔・腸内細菌叢を解析し、口腔・腸内細菌の伝播について種レベルで検討した。その後、追跡調査コホートにおいて、口腔・腸内細菌叢の変化と口腔・腸内細菌の伝播について検討した。最後に、口腔・腸内細菌伝播とHTNとの因果関係をマウスで検討した。

材料と方法
詳細な方法は、補足資料に掲載されている。生配列はNIHのSequence Read Archiveでアクセッション番号PRJNA764503, PRJNA765566, PRJNA774166で入手可能である。

倫理に関する声明
ヒトおよび動物を含むすべての実験は、上海交通大学医学部上海第九人民病院の機関審査倫理委員会（承認番号：SH9H-2018-T66-3）が承認した倫理方針および手順に従って実施された。

研究コホート
横断コホートでは、HTNを有する95名とHTNを有しない対照者39名を募集した。フォローアップコホートは、52名のHTN参加者と26名のコントロールで構成された。HTNの診断は2018 ESC/ESHガイドライン[2]の基準に基づき、歯周炎（PD）はCenters for Disease Control and Prevention/American Academy of Periodontology case definitionsのゴールドスタンダード[15]に従って定義された。HTN の詳細な診断基準は、収縮期血圧（SBP）≥ 140 mmHg および／または拡張期血圧（DBP）≥ 90 mmHg であった。血圧は、オムロン電子血圧計を用いて、医師が5分間隔で3回測定し、その平均値を記録した。PDの詳細な診断基準は，少なくとも2つの⻭間部位でCAL（clinical attachment loss）≧3mm，PD（probing depth）≧4mmであった．これらの条件のいずれかを満たす参加者は除外された。1. 1.妊娠 2.喫煙 3.末梢動脈疾患、自己免疫疾患、心不全、腎不全、癌、過敏性腸症候群、炎症性腸疾患、再発性アフタ性口腔潰瘍などの疾患 4.過去2ヶ月以内に抗生物質やプロバイオティクスで治療中、または口腔・消化器外科・処置を受けている 5.天然歯は8本以下。すべての医療データは、標準的な臨床手順に基づいて収集された。HTN群は、平均12.3年間高血圧を有していた。6ヶ月の追跡期間中、薬物療法に変更はなかった。追跡期間中の体重も有意な変化はなかった。

サンプルサイズの計算
サンプルサイズは、以前に確立された方法[16]を用いて推定された。相関分析において、相関係数 0.25（r = 0.25）[17]、有意水準 5％（α = 0.05）、検定力 80％（β = 0.2）を達成するためには、123 名のサンプルサイズが必要であった。

動物実験
10週齢の雄C57BL/6Jマウスを抗生物質カクテル（ABX）で前処理して腸内細菌叢を枯渇させた後、滅菌水、HTNの有無を問わず参加者の唾液を経口ガベージで処理した。その後、マウスにビヒクル（生理食塩水）またはアンジオテンシンII（Ang II）を含むミニポンプを皮下移植した。血圧はTail-cuffで測定した。

微生物叢の配列決定
口腔内および腸内試料を採取し、DNAを抽出した。16S rRNA遺伝子配列決定とメタゲノム配列決定は、Personal Bio Inc.（中国、上海）でIlluminaプラットフォームを使用して行った。

統計解析
Prism（GraphPad Software）を用いて、Student's t-test、二元配置分散分析、Sidakの多重比較検定、Mann-Whitney U rank-sum (MW) 検定を行った。アルファ多様性と主座標分析（PCoA）距離行列の解析には、それぞれRソフトウェア（バージョン4.0.2）を用いて、クラスカル・ワリス順位和検定と順列多変量分散分析を用いた。性別、飲酒者、HTNなしとHTNありの間の追跡率の統計解析には、ピアソンのカイ二乗検定を使用した。アドニス検定もRソフトで実施した。微生物叢の存在量の解析には、Kruskal-Wallis rank-sum test を用いた。微生物相、臨床パラメータ、代謝産物間のスピアマンの相関を検定し、Rパッケージのcorrplotで可視化した。Mann-Whitney U検定およびWilcoxon rank-sum検定により，個人間および個人内における口腔-腸管サンプルペアの一塩基変異（SNV）距離の検定が実施された．また、Linear discriminant analysis effect sizeを用いて、HTNなしとHTNありで異なる分類群/パスウェイの濃縮度を同定した。

結果
横断研究および追跡研究において、PDは高血圧と関連していた
PDと口腔・腸内細菌叢のBPへの影響を調べるため、134人の参加者を募集し、そのうち39人はHTNなし（no HTN）、95人はHTNあり（表1）。まず、ベースライン時のPDとHTNとの関連を解析した。全コホートをまとめて分析したところ、PDを持つ参加者はPDを持たない参加者（PDなし）に比べて有意に高い収縮期血圧（SBP）を示した（図1A）。非高血圧と高血圧の参加者を別々に分析すると、非高血圧のPD参加者はPDでない人に比べてSBPが高いという強い傾向を示し（図1B）、高血圧のPD参加者はPDでない人に比べて有意に高いSBPを示した（図1C）。PD参加者は、コホート全体でも、非高血圧群と高血圧群に分けた場合でも、PDでない人に比べて拡張期血圧（DBP）が高い傾向があったが、統計的な差は検出されなかった（図1D-F）。これらの結果は、過去の報告[18], [19]とほぼ一致している。

表1. 登録された被験者の人口統計学的特徴

HTNなし HTNあり P値
(HTNなし vs HTNあり）
PDなし
(n = 23) PD
(n = 16) PDなし
(n = 36) PD
(n = 59)
性別 女性16人；男性7人 女性11人；男性5人 女性27人；男性9人 女性32人；男性27人 0.435
年齢（歳） 62.87 ± 2.03 67.38 ± 1.56 67.42 ± 1.82 68.14 ± 0.79 0.057
身長（cm） 163.7 ± 1.25 163.6 ± 1.90 160.6 ± 1.58 163.8 ± 1.07 0.430
体重（kg） 61.13 ± 1.89 65.46 ± 2.29 62.53 ± 2.04 66.14 ± 1.50 0.332
BMI（kg/m2） 22.81 ± 0.69 24.51 ± 0.92 24.12 ± 0.57 24.6 ± 0.46 0.175
収縮期血圧（mmHg） 118.6 ± 2.64 126.2 ± 5.4 126.1 ± 2.25 134.6 ± 1.46 0.0007
拡張期血圧、（mmHg） 75.55 ± 1.56 76.44 ± 2.4 77.82 ± 1.32 80.6 ± 1.1 0.022
プロービングデプス（mm） <4 ≥4 <4 ≥4 NA
アタッチメントロス(mm) <3 ≥3 <3 ≥3 NA
飲酒者, n (%) 2 (8.70%) 1 (6.25%) 3 (8.33%) 5 (8.47%) 0.889
糖尿病患者、n(%) 0 (0.00%) 0 (0.00%) 4 (11.12%) 10 (16.95%) NA
フォローアップ参加者、n 15名（女性9名。
男性6名） 11名（女性8名。
3名） 19名（女性13名。
6人） 33人（女性16人。
男性17名） 0.203
降圧治療, n (%) 0 (0.00%) 0 (0.00%) 30 (83.34%) 48 (81.36%) NA
降圧治療を受けていない、n(%) NA NA 6 (16.66%) 11 (8.64%) NA
データは平均値±SDまたはn(%)で示す。PD、歯周炎。HTN、高血圧。BMI、Body Mass Index。NA、該当なし。

性別、飲酒者、およびHTNなしとHTNありの間の追跡調査参加者の統計解析にはPearsonのカイ二乗検定を使用した。

年齢、身長、体重、BMI、血圧の統計解析にはStudentのt-testを用いた。

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図1. PDの参加者は血圧が高い。A-C、PDの有無にかかわらず、全参加者（A）、非高血圧参加者（B）、高血圧参加者（C）のSBP。D-F、PDの有無にかかわらず、全参加者（D）、非高血圧の参加者（E）、高血圧の参加者（F）のDBP。A-FではStudentのt-testを、GとHでは二元配置分散分析とSidakの多重比較分析を用いて統計解析が行われた。

これらのベースライン時の横断的解析に加え、6ヶ月間のフォローアップ調査を行った。SBPとDBPの両方が、PDの参加者ではフォローアップ期間中、PDでない人に比べて大幅に高かった（図1G、H）。これらの結果を総合すると、PDの参加者はPDでない人に比べて持続的に血圧が高いことが示された。

HTN患者における口腔内および腸内細菌叢の多様性の変化
16S rRNA遺伝子配列決定により、研究対象者の唾液中に38門368属、歯肉縁下プラーク中に31門265属、糞便中に28門113属が同定された（表S1）。α多様性の解析では、HTN患者の微生物叢は、HTN患者でない人と比較して、3種類の試料すべてにおいて、Chao1富、Faithの系統的多様性、Shannon多様性指数、PielouのEvenness指数が低い傾向にあったが、いずれの差異も統計的有意には達しなかった（図2A）。また、シャノン希薄化曲線は、特に腸内細菌叢について、HTN群におけるα多様性の減少傾向を支持し（図2B）、以前に報告された結果[20]と一致した。PCoAは、微生物叢のβ（ベータ）多様性を評価するために実施された（図2C）。Bray-Curtis距離に基づく並べ替え多変量分散分析により、歯肉縁下細菌叢および腸内細菌叢のβ多様性に、HTNなし群とHTN群との間で統計的に有意な差があることが示された(図2D)。また、唾液中の微生物叢のβ多様性の差も、両群間で統計的傾向（p＝0.056）を示した（図2D）。Bray-Curtisに基づくAdonis testの結果では、糖尿病や降圧治療が微生物叢に与える有意な影響は認められなかった（表S2）。

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図2. 高血圧患者の口腔と腸における微生物叢の多様性の変化。A, 高血圧患者の口腔内（唾液および歯肉縁下プラーク）微生物叢と腸内（糞便）微生物叢のChao1、Faithの系統的多様性（Faithの）、Shannon指数、Pielouの均等性（Pielouの）。B, HTNの有無にかかわらず、口腔内および腸内細菌叢のレアファクションカーブ。C. 高血圧の有無にかかわらず、口腔内細菌叢と腸内細菌叢のPCoA。D, 高血圧の有無にかかわらず、口腔内細菌叢と腸内細菌叢のブレイ・カーティス距離。すべての微生物叢は、16S rRNA遺伝子配列決定法を用いて解析した。n=唾液39:94、歯肉縁下プラーク39:93、糞便24:52。統計解析には、AではKruskal-Wallis順位和検定を、Dでは順列多変量分散分析を用いた。

HTN患者における口腔内細菌叢と腸内細菌叢の組成の変遷
門レベルでの相対的存在量の積み重ね棒グラフは、HTNなしとHTNの間の口腔および腸内細菌叢における明らかな違いを示した（図3A）。唾液と歯肉縁下プラークではFirmicutes、Bacteroidetes、Proteobacteria、Actinobacteria、Fusobacteriaが、糞便ではFirmicutesとBacteroidetesが優勢だった（図S1、相対量>10％）。HTNでは、3種類の試料すべてにおいてFirmicutesが非HTNに比べて有意に減少し、ProteobacteriaがHTNの唾液と歯肉縁下プラークにおいて有意に増加した（図3B）。さらに、唾液と歯肉縁下プラークでは、BacteroidetesがHTNでない群で濃縮されていたが、ActinobacteriaとFusobacteriaはHTN群で濃縮されており、糞便では、Bacteroidetes、Proteobacteria、Actinobacteria、FusobacteriaはHTN群で濃縮されていたが、これらの違いは統計的有意には達しなかった(図3B)。さらに、属レベルで微生物叢の構成を解析した。上位50属のうち、唾液微生物叢で14属、歯肉縁下微生物叢で15属、腸内細菌叢で10属が、HTNなしとHTNありで有意差を示した（p < 0.1）（図3C）。

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図3. HTN患者における口腔内および腸内細菌叢の組成変化。A. HTNの有無を問わず、口腔内（唾液および歯肉縁下プラーク）微生物叢と腸内（糞便）微生物叢の門レベルでの相対的存在量を示す積み重ね棒グラフ。B. 高血圧の有無にかかわらず、上位5つの動物門の濃縮度の差を示す箱ひげ図。C. クラスタリングヒートマップは、HTNの有無にかかわらず、参加者の上位50属の相対的な存在度を示す。すべての微生物叢は、16S rRNA遺伝子配列決定法を用いて分析した。n = 唾液39:94、歯肉縁下プラーク39:93、糞便24:52。統計解析には、BではMann-Whitney U rank sum (MW) testを、CではKruskal-Wallis rank sum testを使用した。

口腔・腸内細菌叢とBPおよび他の臨床パラメータとの関連性
HTNにおける口腔・腸内細菌叢の変化の臨床的意義を評価するため、唾液、歯肉縁下プラークおよび糞便中の上位50属の相対存在度と臨床パラメーターとの関連を評価するために、スピアマンの相関分析を実施した。まず、微生物叢と血圧との関連を検討した。SBPは唾液中のActinobacillusと有意な正の相関、Catonella, Megasphaera, Prevotella, Veillonella, [Prevotella] と負の相関を示し（図4A）、歯肉溝中のLautropiaとRothiaと有意な正の相関、Atopobium, Prevotella, Selenomonas, Dialister, Olsenella, Desulfomicrobium, [Polyangium] と負の相関を示した（図4B）。DBPは，唾液中ではRothiaと有意な正の相関，Catonellaと負の相関を示し（図4A），歯肉縁下プラーク中ではOribacteriumと有意な正の相関，[Polyangium] および Neisseriaと負の相関を示した（図4B）．腸内細菌叢については，SBP，DBPともにCollinsellaと有意な正の相関，Faecalibacterium，Roseburiaと負の相関を示し（図4C），DBPはWeissella，Lachnobacterium，[Prevotella]と有意な正の相関を示した（図4C）．BPと有意な正の相関を示す属、またはHTNで有意に増加する属（図3Cに基づく）はすべて赤で強調表示し、BPと有意な負の相関を示す属、またはHTNで有意に減少する属（図3Cに基づく）はすべて青で強調表示した（図4A-C）。

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図4. 口腔/腸内細菌叢と血圧およびその他の臨床パラメータとの関連性。唾液（A）、歯肉縁下プラーク（B）、糞便（C）の微生物叢における上位50属の相対量と臨床パラメータ（血圧、免疫、炎症マーカー）の間のスピアマンの相関係数のヒートマップ。IL-6: インターロイキン-6、PCT: プロカルシトニン、CRP: C反応性タンパク質、WBC: 白血球、Eo_c: 好酸球数、Baso_c: 好塩基球数、Neut_c: 好中球数、Mono_c: 単球数、Ly_c: リンパ球数、Eo_r: 好酸球比率、Baso_r：好塩基球比率、Neut_r: 好中球比率、Ly_r: リンパ球比率、Mono_r: 唾液と歯肉縁下プラークはn=77、糞便は76であった。#p(FDR) < 0.1, *p(FDR) < 0.05, **p(FDR) < 0.01, ***p(FDR) < 0.001.である。

HTNにおける炎症の重要性[21]を考慮し、次に炎症マーカーと微生物叢の関連性を分析した。インターロイキン-6（IL-6）は、唾液中7種、歯肉縁下10種、糞便中6種と有意な相関があった（図4A-C）。プロカルシトニンは、唾液中2種、歯肉縁下12種と有意な相関を示した（図4 A-B）。C反応性蛋白（CRP）は、唾液腺6属、歯肉縁下9属、糞便6属と有意な相関があった（図4A-C）。特に、唾液性Porphyromonas属、歯肉縁下Porphyromonas属、Fusobacterium属、Treponema属などのPD関連属は血漿中IL-6と有意な正の相関を示し、唾液性Porphyromonas属は血漿中CRPと有意な正の相関を示していた（図4A-B）。

さらに、赤色または青色でハイライトされた微生物に着目し、免疫学的パラメータと微生物叢の関連を解析した。白血球数および白血球比は、口腔・腸内細菌叢の存在量と類似の相関パターンを示した（Fig.4A-C）。興味深いことに、各サンプルタイプにおいて、Veillonellaは少なくとも1つの白血球数/白血球比と有意に相関していた（Fig. 4A-C）。また、口腔/腸内細菌叢と、身体測定値、免疫グロブリン、赤血球、血小板、肝・腎機能、代謝形質、電解質などの他の臨床パラメータとの相関も確認した（Fig. S2）。

これらの結果から、口腔・腸内細菌叢と血圧・その他の臨床パラメータとの間に密接な相関があることが明らかになり、微生物叢が血圧に直接影響するか、血圧関連の臨床パラメータを調節することによって血圧に影響を及ぼす可能性が示唆された。

HTNにおける口腔内と腸内細菌叢のコミュニケーション
口腔-腸内細菌伝達の重要性は、様々な疾患において認識されている[14], [22]。次に、我々は、HTNにおける口腔と腸の微生物叢の間の潜在的なコミュニケーションを調査するために、解析を拡張しました。微生物量共相関ネットワークは、3種類のサンプルすべてにおいて、HTNに富むネットワークは、HTNに富んでいないネットワークよりも相互接続が多いことを示した（図S3A）。

ベン図を用いた異なる種類の試料間の微生物相の比較により、唾液、歯肉縁下プラーク、および糞便中に共存する121の共有属が同定された（図5A）。上位30種の共有属の相対量と有病率は、口腔内試料と腸内試料の間で相互関係を示した（口腔内試料で高く、腸内試料で低い、逆もまた然り）（Fig.5B）。Veillonella、Porphyromonas、Streptococcus、Prevotellaなど、通常は口腔内に存在する属が、HTN参加者の腸内ではHTNなしよりも有病率や存在量が多かった（Fig. 5B）。最も顕著な変化は、HTN患者の腸内におけるVeillonellaの相対的存在量が、HTN患者でない人に比べて急増したことである（図5B）。これらのデータは、Veillonellaのような経口由来の属が腸内で異所的にコロニー形成していること、そしてHTNがその異所的コロニー形成を促進することを示唆している。

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図5. 図5. 高血圧の有無にかかわらず、口腔内細菌叢と腸内細菌叢の間のコミュニケーション。A. 唾液、歯肉縁下プラーク、および糞便の間でユニークなOTUと共有されるOTUを示すベン図。唾液、歯肉縁下、腸内細菌叢で共有されている121属のうち、最も豊富な30属をB-Gの解析に使用した。B. 高血圧なしと高血圧ありの上位 30 種の共有属の有病率と相対存在比。糞便」列の挿入図は、低存在量の腸内細菌15属の相対存在量を拡大したY軸で示す。C-D. 唾液中（C）または歯肉縁下（D）の微生物叢の共有属の相対存在量と腸内細菌叢の共有属の相対存在量との間のスピアマンの相関係数のヒートマップ。E-G. 唾液（E）、歯肉縁下（F）、腸内（G）微生物叢における上位30種の共有属の相対的存在量の間のスピアマンの相関係数のヒートマップ。#p(FDR) < 0.1, *p(FDR) < 0.05, **p(FDR) < 0.01, ***p(FDR) < 0.001.である。

次に、口腔と腸のサンプルタイプ間の共有属数上位30属の相関を分析し、特にVeillonellaに注目した。腸内Veillonellaの相対量は、唾液中のGemmiger、Faecalibacterium、Porphyromonas、Streptococcusと有意な相関があった（Fig. 5C）。しかし、腸内Veillonellaと歯肉縁下細菌叢との間には有意な相関は認められなかった（Fig.5D）。これらの結果は、Veillonellaの潜在的な異所性コロニー形成は、歯肉縁下よりもむしろ唾液属に関与している可能性が高いことを示唆した。SourceTracker解析の結果、HTNは腸内細菌叢において唾液由来の割合を増加させ、歯肉縁下プラーク由来の割合を減少させる傾向があり（図S3B）、Veillonellaの唾液-腸コミュニケーションはHTNと関連していることが示唆された。さらに、Veillonellaと上記4属（Gemmiger、Faecalibacterium、Porphyromonas、Streptococcus）の関係を各サンプルタイプで調べた（図5E-G）。StreptococcusとVeillonellaの関係は，唾液，歯肉縁下プラーク，糞便の各サンプルタイプにおいて，この2属間の相関のみが有意かつ正であり，注目された（図5E-G）．StreptococcusとVeillonellaは消化管内で共通のコロニー形成者であり[23], [24]，Streptococcusは乳酸を生産してVeillonellaの増殖を促進することができる[25]という報告が過去になされている．唾液中のStreptococcusとVeillonellaが腸内で異所的に共培養され、BPに影響を与えている可能性がある。したがって、これらのデータは、HTNにおける口腔と腸の微生物叢の間の潜在的なコミュニケーションを示唆するものであった。

唾液と歯肉縁下プラークの上位30属の相関を解析したところ、183の有意な相関が認められた。中でも、唾液中の10属と歯肉縁下プラークの9属の間の有意な正の相関は、予想通り唾液と歯肉縁下プラーク間の微生物叢の強いコミュニケーションを示唆していた（図S3C）。

HTNにおける微生物叢の口腔-腸管間の伝達を種レベルで検討する
口腔と腸の微生物相のコミュニケーションについてさらに調べるため、HTN患者でない24人とHTN患者36人の口腔と腸のサンプルのショットガンメタゲノムシークエンシングを行った。優勢種の共相関ネットワークから、3種類のサンプルすべてにおいて、HTNに富むネットワークはHTNに富まないネットワークよりも相互結合が多いことが示されました（図S4）。線形判別分析の効果量（LEfSe）により、HTNと非HTNで濃縮された微生物種が異なることが明らかになった（図S5A-C）。興味深いことに、PD関連種（Porphyromonas gingivalis、Tannerella forsythia、Treponema denticola、Porphyromonas endodontalis）はHTN参加者の歯肉下プラークに有意に濃縮されていた（図S5B）。LEfSeはまた、HTNとHTNでない人の間で異なる濃縮された微生物機能モジュールを明らかにした（図S6A, B）。口腔内サンプルの微生物遺伝子機能の大部分は、腸内サンプルのそれと重複しており、口腔内と腸の微生物叢の間で機能モジュールが共有されていることが示されました（図S6C）。複数の微生物機能モジュールは、BPおよび他の臨床パラメータと有意に相関していた（図S7）。

口腔サンプル（唾液と歯肉縁下プラークを合わせたもの）で流行している461種、糞便で流行している1095種、そして口腔と腸の両方のサンプルで流行している213種を検出した（図6A）。これまでの報告では、微生物種のレベルではなく、菌株のレベルで微生物社会を追跡することが、微生物相の伝播の確立と定量化にはより信頼性が高いことが示唆されている[26], [27]。そこで、私たちはメタゲノムシーケンスデータに含まれるSNVを解析した。口腔-腸管サンプルペアのSNV距離行列から得られたマンハッタン距離に基づき、口腔-腸管サンプルで共有される213種のうち16種が口腔-腸管伝達物質として同定され、そのうち4種（Streptococcus equinus, Streptococcus parasanguinis, Veillonella parvula, Veillonella atypica）は、口腔-腸管伝達スコアにより頻繁伝達物質、残りの12種は時々伝達物質に分類されました(Fig. 6B). これらの16菌は，3門（Firmcutes，Proteobacteria，Bacteroidetes），5属（Veillonella，Streptococcus，Haemophilus，Prevotella，Megasphaera）に属し，ほとんどの菌が糞便より口腔試料（特に唾液）に多く含まれていた（図6C-F）．Streptococcus属とVeillonella属の属レベルでの負の相関（図5C-D）と同様に、口腔内Streptococcus属と腸内Veillonella属の関連はほとんどが負の相関であった（図6C）。

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図6. HTNの有無にかかわらず、参加者における口腔-腸内細菌叢の伝達を種レベルで示した。すべての微生物叢はメタゲノム配列解析により解析された。A. 口腔サンプル（唾液および歯肉縁下プラーク、S&Pと略す）、腸サンプル（糞便、Fと略す）、または口腔と腸の両方のサンプル（S&P&F）に広く存在する微生物種の概要。B. メタSNV解析に基づく口腔内および腸内細菌叢の共有種の口腔-腸内伝播スコア。塗りつぶされた菱形は、Wilcoxon rank-sum検定によるp < 0.05を示し、対応する種は頻回伝達物質として分類される。開いた菱形は、Wilcoxon rank-sum検定ではp>0.05、Mann-Whitney U rank sum検定ではp<0.05であり、対応する種はoccasional transmittersに分類されることを示した。C. 口腔内（唾液および歯肉下）微生物叢における16種の口腔-腸内伝達物質の相対存在量と腸内微生物叢における相対存在量との間のスピアマンの相関係数のヒートマップ。D-F. 唾液（D），歯肉縁下プラーク（E），糞便（F）における高頻度伝播種と臨時伝播種の相対的存在量（A-Cではn＝60，D-Fでは24：36）．#p(FDR) < 0.1, *p(FDR) < 0.05, **p(FDR) < 0.01, ***p(FDR) < 0.001.であった。

糞便中のこれら16種の相対量に対するHTNの影響は、Megasphaera micronuciformis（およびその属するMegasphaera属）を除いて、属レベルでの影響とほぼ一致した（図6F、S8）。重要なことは、Veillonella属の4種すべて（Veillonella parvula, Veillonella atypica, Veillonella dispar, Veillonella sp.口腔内分類群158）がHTN群では非HTN群と比較して増加したことである（図6F）。したがって、Veillonella属を中心とする16種の口腔腸管感染種は、HTNにおいて重要な役割を担っている可能性が示唆された。

HTNにおける微生物叢の持続的な経口腸管伝播
口腔内と腸の両方の微生物叢は時間とともに変動する[28], [29]。我々は、高血圧患者52名と対照者26名を対象とした追跡調査を実施し、高血圧における微生物叢の変化と口腔-腸管間の伝達が持続的であるかどうかを検討した。その結果、6ヶ月前のHTN群と非HTN群のα多様性の低さとは異なり、HTN被験者の唾液中および歯肉下の微生物叢は、いずれもChao1富、Faithの系統的多様性およびShannon多様性指数が高いことが明らかになった（図7A）。腸内細菌叢のこれら3つの指標とPielouのEvenness指数は、すべてのサンプルタイプで以前と同様の傾向を維持した（図7A）。PCoAおよびBray-Curtis距離に基づく並べ替え多変量分散分析により、HTNなし群とHTN群との間で、腸内細菌叢のβ多様性に有意差があることが示されたが、口腔内細菌叢には有意差は認められなかった（図7B、S9）。この2つの時点の多様性の違いから、腸内細菌叢は口腔内よりも変動が少ないことが示唆された。

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図7. HTN患者における6ヶ月後の口腔-腸管間の持続的な感染。A. 高血圧患者の口腔内（唾液および歯肉縁下プラーク）細菌叢と腸内細菌叢のChao1、Faithの系統的多様性（Faithの）、Shannon指数およびPielouの均等性（Pielouの）。B. HTNの有無にかかわらず、参加者における口腔内および糞便中の微生物叢のBray-Curtis距離。C. SourceTracker解析による口腔から腸、口腔内の微生物コミュニケーションの推定。D. クラスタリングヒートマップは、HTNの有無にかかわらず、参加者の上位50属の相対的な存在量を示している。E. 排泄物中の口腔・腸内感染性5属の相対的存在量。すべての微生物叢は、16S rRNA遺伝子配列決定法を用いて分析した。n = 唾液24:43、歯肉縁下プラーク25:43、糞便24:38。統計解析には、AおよびBではクラスカル・ワリス順位和検定、CおよびEではスチューデントのt検定、Dでは順列多変量分散分析を使用した。

追跡調査コホートにおけるSourceTracker解析は、HTNにおける口腔-腸内コミュニケーションの増加を示唆し、特に腸内細菌叢における唾液由来の微生物の割合が有意に増加したことによって明らかになった（図7C）。各サンプルタイプにおける上位50属の構成は6ヶ月前と同様であったが、HTNなしとHTNありで有意に異なる属があった（図7D）。口腔内腸管感染種16種が属する5属のうち、Veillonellaの相対量がHTN参加者の腸内細菌叢で有意に増加し（図7E）、6カ月前の結果と一致した（図S8）。これらのデータを総合すると、HTNにおける口腔-腸管間の伝達の安定性と口腔微生物叢の異所性コロニー形成が示唆された。

口腔-腸管間の微生物伝播とHTNとの因果関係
口腔腸管伝達物質とHTNとの因果関係を調べるために、ABXで前処理したレシピエントマウスにビヒクル（生理食塩水）またはAng IIを注入して唾液微生物叢の移植実験を行った（Fig.8A）。テールカフBP測定により、HTN参加者の唾液を受けたマウス（HTN-唾液）は、Ang II注入後、HTN参加者なしの唾液（HTN-唾液なし）または水を受けたマウスに比べて、有意に高いSBPおよび/またはDBPを示した（Fig. 8B）。また、Ang IIによる大動脈の肥大と線維化は、HTN-唾液を投与されたマウスでは、HTN-唾液を投与されなかったマウスや水と比較して有意に増加した（図8C-D）。さらに、Ang IIによる大動脈のコラーゲンIの発現、心臓のANPおよびBNPの発現は、HTN-唾液を投与したマウスで顕著に増加した（図8E-F）。また、HTN-唾液を摂取したマウスから単離した腸間膜動脈は、フェニレフリンおよびAng IIに応答してより強い収縮を示した（図S10）。これらの結果は、HTN-唾液のマウス腸管における異所性コロニー形成が、アンジオテンシンII誘発性高血圧症を悪化させることを示している。

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図8. 高血圧患者の唾液微生物叢のマウス腸管への異所性コロニー形成は高血圧を増悪させる。A. 実験デザインの模式図。ABX：抗生物質カクテル、Ang II：アンジオテンシンII。B. マウスのSBPとDBPの非侵襲的なテールカフ・モニタリング。C. 胸部大動脈の代表的なH&E染色（左）と壁の厚さの定量化（右）。倍率＝200×。各サンプルで3フィールドを無作為に選んで定量化した。D. 胸部大動脈の代表的なPicrosirius red染色（左）と線維化領域の定量化（右）。倍率＝200×。各サンプルから無作為に3フィールドを選び、定量化した。E-F. 胸部大動脈のコラーゲンI（E）および左心室の心房性ナトリウム利尿ペプチド（ANP）およびB型ナトリウム利尿ペプチド（BNP）のQRT-PCR解析（F）。G. マウス糞便のPCoA。H. ヒトの唾液とマウスの糞便中の上位20種の微生物属の相対量を示す棒グラフの重ね描き。I. マウスの腸内細菌叢のLEfSe。LDAスコアの閾値は2。 J. マウス腸内細菌叢におけるVeillonellaの相対的存在量。K. マウスの腸内細菌叢の属レベルでのランダムフォレスト回帰分析。H2O + Vehicle vs HTN-saliva + Vehicle vs HTN-saliva + Vehicleではn = 3:3:3; H2O + Ang II vs HTN-saliva + Ang II vs HTN-saliva + Ang IIではn = 5:5:4 であった。## (B)の35日目におけるHTN-saliva + Ang IIなし vs HTN-saliva + Ang IIの#p < 0.01; *p < 0.05, **p < 0.01, *** p < 0.001.

我々の臨床研究で同定された口腔内-腸管伝達物質の重要性を検証するため、ヒト唾液とヒト唾液を投与したマウスの糞便について16S rRNA遺伝子配列の解析を実施した。PCoAにより、HTN-唾液を投与されなかったマウスとHTN-唾液を投与されたマウスの腸内細菌群集組成は完全に分離していたが、Ang II注入後はより類似していた（図8G）。ABX前処理により、マウス腸内細菌叢のすべての口腔腸管伝達属（Veillonella, Streptococcus, Prevotella, Haemophilus, Megasphaera）が枯渇した（Fig. S11）。ヒト唾液サンプルは、すべての感染性属を含んでいたが（図8Hでは4属、Megasphaeraは存在量が少ないため示さず）、唾液処理したすべてのマウスの腸内で、Veillonellaのみがコロニー形成に成功し提示した（Streptococcusは2匹のマウスでのみ検出された、図8H）。重要なことは、HTN-唾液を投与し、Ang IIを注入したマウスの腸内細菌叢では、Veillonellaがより濃縮され（図8I）、より豊富であった（図8J）ことである。さらに、ヒト唾液を投与し、Ang IIを注入したマウスの腸内細菌叢のランダムフォレスト回帰分析によると、Veillonellaの重要性が最も高かった（Fig. 8K）。

これらの動物実験の結果は、我々の臨床研究の結果とほぼ一致している。HTN-唾液を移植されたマウスは、BPが有意に上昇した。唾液由来のVeillonellaがマウス腸内でより多く存在することが、口腔-腸内微生物感染とHTNとの因果関係を示している可能性がある。

考察
PDは口腔微生物関連疾患であり、HTNとの関連性が指摘されている[19], [30], [31]。しかし、口腔内細菌叢とHTNとの直接的な関係や、HTNにおける口腔-腸内細菌叢の伝播に焦点を当てた研究はほとんどない。今回、我々は初めて、16S rRNA遺伝子配列とメタゲノム配列の解析により、無高血圧と高血圧の間の口腔内と腸内細菌叢の包括的解析を報告した。PDと高血圧の関連を立証することに加え、我々のデータは、高血圧でない人と高血圧の人の口腔および腸内細菌叢の多様性と組成の違いを明らかにし、また口腔/腸内細菌叢と臨床パラメータの相関を確立しました。我々は、口腔・腸内細菌の伝達物質を属と種の両方のレベルで同定した。特に、Veillonella spp.は、16種の口腔腸管伝達物質の中で、高血圧症に重要な機能を発揮する可能性があることが分かりました。

我々の結果は、PDと高血圧の関連性をより強固なものにした。最近の系統的レビューおよびメタ分析によると、PD患者はPDでない患者に比べてSBPおよびDBPがそれぞれ4.5および2.0mmHg高いことが示されている[32]。我々の結果は、高血圧および正常血圧の両方の参加者において、PDとBPとの間のこのような関連を確認した。本研究におけるPDなしとPDの間のBPの差は、以前に報告されたものよりも大きかったが、これはおそらく研究集団の違いによるものであろう［19］。より重要なことは、我々のデータで初めて、PDの参加者は横断的研究だけでなく追跡調査でもBPが高いことが示され、PDが高血圧の発症と進行の両方に影響を与える可能性があることが示唆されたことである。また、PDの参加者とPDでない参加者の両方で、追跡調査中に血圧が低下する傾向を観察したが、これはおそらく、季節の変化（この場合は冬から夏）および時間の経過とともに参加者が不安を感じなくなったためと考えられる[33], [34]．我々の研究とこれまでの研究を合わせると、PDはHTNの重要な危険因子であり、継続的に監視する必要があることが強く支持される。

我々は、口腔内細菌叢と HTN の強い関連性を支持する包括的な証拠を提供した。我々は、高血圧症において有意に変化し、かつ／または血圧と有意に相関する口腔内細菌属のホストを観察した。これらの属のうち、口腔内 Streptococcus と Prevotella の相対量は、高齢女性の歯肉縁下プラークを用いた先行研究[8]の結果と一致し、高血圧患者において有意に減少していた。Veillonellaは、低血圧と関連する口腔内の重要な硝酸塩還元属であることが報告されている[35]。興味深いことに、食事性硝酸塩には有益な血圧低下作用があり、口腔マイクロバイオームは、常在菌が硝酸塩を亜硝酸塩に変換するのに必要であり、後者はさらに一酸化窒素に変換されて血圧を下げるという重要な役割を果たしている[36], [37]．本研究では、Neisseria、Haemophilus、Rothia などの他の硝酸塩還元菌は HTN で増加したが、口腔内 Veillonella の相対量は HTN で著しく減少し、血圧と負の相関があった。また、口腔内のBurkholderia、Lautropia、Ralstoniaの相対量は、高血圧患者において有意に増加した。興味深いことに、これら3つの属は肺動脈性肺高血圧症との相関が示されています[38], [39]。さらに、我々は、Actinobacillus, Aggregatibacter, Atopobium, Bulleidia, Cupriavidus, Desulfomicrobium, Eikenella, Euzebya, Kingella, Moraxella, Olsenella, Pasteurella, Pelomonas および Selenomonasといった口腔微生物と HTN の関連性を新たに確立した。また、Porphyromonas、Fusobacterium、TreponemaなどのPD関連病原体は、HTN患者の歯肉縁下プラークに多く存在し、IL-6やCRPと正の相関があることが明らかになった。これら3つのPD関連病原体とPrevotellaは、Porphyromonas gingivalis由来のgingipainやPrevotella intermedia由来のlipopolysaccharideといった微生物毒素を介した炎症促進的な役割を果たすことが報告されている[40], [41], [42], [43]. これらの関連は、HTNにおける口腔内細菌叢の重要性をさらに立証するものであった。

本研究の最も新しい知見は、HTNにおける重要な口腔-腸管伝達微生物の同定である。HTN参加者の腸内細菌叢に関する我々の全体的な知見は、以前に報告されたものと一致していた（例えば、同様のα多様性と属の濃縮）[20]。我々はさらに、口腔腸管伝達微生物の影響を調査し、BP調節に関与する可能性のある口腔腸管伝達微生物を発見した。横断的コホートと追跡調査コホートの両方におけるSourceTracker分析では、HTN参加者において口腔と腸の微生物叢の間の伝達が増加していることが示唆されました。属レベルでの相関分析により、口腔内と腸内細菌叢間のコミュニケーションが示され、VeillonellaやStreptococcusなどの口腔由来の属は、腸内で異所性に共コロニー化し、血圧に影響を与える可能性があることが示された。さらに、種レベルでの解析により、5つの属（Veillonella, Streptococcus, Haemophilus, Prevotella, Megasphaera）に属する16種の口腔-腸管感染種が同定され、これらは高血圧症に重要な役割を果たす可能性があることがわかった。これらの5つの属はすべて、相対的な存在量が高い口腔内の中核的な分類群であることを指摘する価値がある[44]。興味深いことに、Megasphaeraを除く残りの4属は、以前報告されたように、口腔-腸内細菌伝播のカテゴリーに分類されます[9]。腸内細菌が交感神経に極めて重要な役割を果たすことを考えると、口腔由来の腸内細菌もコロニー形成後に脳腸軸を介してBPに影響を与える可能性があります[45]。

Veillonellaは、HTNにおける経口腸内細菌伝達物質の中で、卓越した地位を獲得しています。横断的コホートおよび追跡調査コホートの両方で、HTN患者において糞便中のVeillonellaの相対存在量が有意に増加した。16種の口腔腸管感染種のうち、4種すべてのVeillonellaが、HTN参加者で濃縮されていた。口腔内細菌叢の腸内における異所性コロニー形成は、通常、疾患の特徴と考えられている[12], [46], [47]. Veillonellaを含む経口由来の腸内細菌は、大腸がんを区別・予測する診断モデルの確立に用いられ、高い有効性を示している[48]。また、Veillonellaは自己免疫性肝炎で拡大した病態の可能性があり、病態との関連も指摘されています[49]。さらに、Veillonella atypical や Veillonella dispar などの口腔内細菌叢は、統合失調症患者の腸に転移している可能性があります[50]。今回の結果から、Veillonellaは強い口腔-腸管移行性を持つことが確認されました。特に、ヒトの唾液を移植したマウスの腸内に唾液由来の Veillonella が定着したことから、口腔が Veillonella の異所性定着のリザーバーであることが示唆された。また、Ang II注入マウスでは、唾液由来のVeillonellaがより豊富に存在し、高血圧状態下でよりコロニー化しやすいことが示唆された。さらに重要なことは、高血圧患者の唾液を移植したマウスでは、Veillonellaのコロニー形成の高濃度化に伴い、血圧が有意に上昇したことであり、口腔内のVeillonellaの異所性コロニーが高血圧の発症・進展に影響を及ぼす重要な因子であることが示唆された。本研究では雄マウスのみを用いたが、これは高血圧動物モデルにおける性差を考慮すると限界であった[51]。

以上のことから、本研究は、PDとHTNの関連性を強化し、口腔・腸内細菌叢とHTN/HTN関連臨床パラメータの間に強い相関を確立し、さらにHTN関連口腔・腸内伝達微生物を同定したものである。これらのデータは、HTNにおけるPDと口腔内細菌叢の役割を包括的に示し、特にVeillonella属などの微生物の口腔・腸内伝播の重要性を明らかにしました。 これらの知見はPDとHTNの共同管理を支持し、腸内の口腔由来の微生物の特定はHTNの予防、診断、治療に対する新しい戦略を提供する可能性があると考えられます。

結論
PDは常にHTNと関連している。口腔内および腸内細菌叢のディスバイオーシスは、PDとHTNの関連性を強調する。微生物、特にVeillonella属の口腔-腸内伝播は、HTNに寄与する重要な機序である。定期的なPDのモニタリングと口腔・腸内細菌伝播のターゲティングは、高血圧の予防と治療を改善するための有効な戦略となる可能性がある。

倫理的要求事項の遵守
本研究プロトコルは、上海交通大学医学部上海第九人民病院施設審査倫理委員会（SH9H-2018-T66-3）の承認を得た。登録前にすべての被験者がインフォームドコンセントに署名した。

CRediTのオーサーシップ・コントリビューション・ステートメント
Bo-Yan Chen：概念化、ソフトウェア、方法論、形式分析、執筆 - レビューと編集、調査、検証、データキュレーション、プロジェクト管理、可視化。Wen-Zhen Lin: 調査、バリデーション、データキュレーション、プロジェクト管理。Yu-Lin Li: 調査、検証、データキュレーション、プロジェクト管理。Chao Bi：調査。Lin-Juan Duさん。調査 Yuan Liu：調査 Lu-Jun Zhou：調査 調査 劉 庭（リュウ ティン）：調査 シュオ・シュウ 調査 石 超智（シー・チャオジ）：調査 朱宏：調査 王永蕾（ワン・ヨンリ 調査 孫建永 調査 Yan Liu：調査 Wu-Chang Zhang：調査。Hai-Xia Lu：調査 王毅華：調査 王義華：調査 馮強（フォン・チアン）：調査 陳福祥（チェン・フーシアン）：調査 王 昌賢（ワン・チャンケン 調査 Maurizio S. Tonetti：調査。Ya-Qin Zhu: Ya-Qin Zhu：資金獲得、監修。Huili Zhang: 資金獲得、監督。Shung-Zhong Duan: 概念化、ソフトウェア、方法論、形式分析、執筆 - 査読と編集、資金獲得、監修。

利害関係者の宣言
著者らは、本論文で報告された研究に影響を及ぼすと思われる既知の競合する金銭的利益や個人的関係がないことを宣言するものである。

謝辞
本研究は、中国国家自然科学基金（81725003、81991503、81991500、81921002）、上海科学技術委員会指導医学プロジェクト（19411963300）、上海ハイレベル地方大学革新研究チーム（SHSMU-ZDCX20212500）、国家口腔疾患臨床研究センター（NCRCO2021-omics-07）からの補助金によって行われました。

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参考文献
[1]
S. Oparil, M.C. Acelajado, G.L. Bakris, D.R. Berlowitz, R. Cífková, A.F. Dominiczak, et al.
高血圧症
ハイパーテンション Nat Rev Dis Primers, 4 (1) (2018)
Google Scholar
[2]
Williams B, Mancia G, Spiering W, Agabiti Rosei E, Azizi M, Burnier M, et al. 2018 ESC/ESH Guidelines for the management of arterial hypertension.（動脈硬化症管理のためのESC/ESHガイドライン）. Eur Heart J. 2018;39(33):3021-104.
Google Scholar
[3]
T. Yang, M.M. Santisteban, V. Rodriguez, E. Li, N. Ahmari, J.M. Carvajal, et al.
腸内細菌の異常は高血圧と関係がある
高血圧, 65 (6) (2015), pp.1331-1340
ScopusGoogle Scholarで記録を見る
[4]
P.N. Deo、R. Deshmukh
口腔内マイクロバイオーム。基本を解き明かす
J Oral Maxillofac Pathol, 23 (1) (2019), pp.122-128
ScopusGoogle Scholarで記録を見る
[5]
C. ツィウフィス、A.カシアコギアス、C.トモプロス、C.ステファナディス
歯周炎と血圧：歯科高血圧の概念について
アテローム性動脈硬化症, 219 (1) (2011), pp.1-9
記事ダウンロードPDF表示ScopusGoogle Scholarでの記録
[6]
Czesnikiewicz-Guzik M, Osmenda G, Siedlinski M, Nosalski R, Pelka P, Nowakowski D, et al. 歯周炎と高血圧の因果関係：メンデル無作為化および非外科的歯周治療の無作為比較試験からのエビデンス. Eur Heart J. 2019;40(42):3459-70.
グーグルスカラー
[7]
G.ハジシェンガリス、T.チャバキス
歯周病と炎症性併発症をつなぐ局所的・全身的メカニズム
Nat Rev Immunol, 21 (7) (2021), pp.426-440
CrossRefView レコードをScopusGoogle Scholarで見る
[8]
J.H. Gordon, M.J. LaMonte, R.J. Genco, J. Zhao, L.u. Li, K.M. Hovey, et al.
高齢女性における口腔マイクロバイオームと血圧の関連性？
高血 圧 Cardiovasc Prev, 26 (3) (2019), pp.217-225
CrossRefView Record in ScopusGoogleスカラー
[9]
T.SB. Schmidt, M.R. Hayward, L.P. Coelho, S.S. Li, P.I. Costea, A.Y. Voigt, et al.
消化管に沿った微生物の広範な伝播
エライフ, 8 (2019)
Google Scholar
[10]
アチャリアC、サヒンガーSE、バジャジJS. 微生物叢、肝硬変、および新興の口腔-腸-肝臓軸。JCIインサイト. 2017;2(19).
グーグル スカラー
[11]
E.M.デュ・テイル、G.ガバリーニ、H.J.M.ハルムセン、J.ウェストラ、A.J.ファン・ウィンケルホフ、J.M.ファン・ダユル
腸と対話する：関節リウマチの病因における口腔-腸内細菌叢軸とその免疫調節的役割
FEMS Microbiol Rev, 43 (1) (2019), pp.1-18
Google Scholar
[12]
K. Atarashi, W. Suda, C. Luo, T. Kawaguchi, I. Motoo, S. Narushima, et al.
腸内細菌の異所性コロニー形成はT1細胞の誘導と炎症を促進する
サイエンス（ニューヨーク州ニューヨーク）, 358 (6361) (2017), pp.359-365
CrossRefView Record in ScopusGoogleスカラー
[13]
Narengaowa, Kong W, Lan F, Awan UF, Qing H, Ni J. The Oral-Gut-Brain AXIS: The Influence of Microbes in Alzheimer's Disease. Front Cell Neurosci. 2021;15:633735.
Google Scholar
[14]
Z. Ren, H. Wang, G. Cui, H. Lu, L. Wang, H. Luo, et al.
COVID-19におけるヒト口腔および腸内細菌叢の変化とリピドミクス
Gut, 70 (7) (2021), pp.1253-1265
CrossRefView Record in ScopusGoogleスカラー
[15]
P.I.エケ、R.C.ページ、L.ウェイ、G.ソーントン-エヴァンス、R.J.ジェンコ
歯周炎の集団ベースのサーベイランスのための症例定義の更新
J Periodontol, 83 (12) (2012), pp.1449-1454
CrossRefView Record in ScopusGoogle Scholar
[16]
J.M. Lachin
臨床試験のサンプルサイズ決定と検出力分析への導入
コントロールクリニックトライアルズ，2（2）（1981），pp.93-113
記事ダウンロードPDF表示ScopusGoogle Scholarの記録
[17]
Z. Jie, H. Xia, S.-L. Zhong, Q. Feng, S. Li, S. Liang, et al.
アテローム性心血管病における腸内マイクロバイオーム
Nat Commun, 8 (1) (2017年)
Google Scholar
[18]
P.P. Hujoel、M. Drangsholt、C. Spiekerman、T.A. DeRouen
歯周病と冠動脈心疾患リスク
JAMA, 284 (11) (2000), pp.1406-1410
ScopusGoogle Scholarで記録を見る
[19]
D. Pietropaoli, R. Del Pinto, C. Ferri, J.T. Wright, M. Giannoni, E. Ortu, et al.
米国の高血圧成人における口腔内の健康不良と血圧コントロール
ハイパーテンション, 72 (6) (2018), pp.1365-1373
CrossRefView レコードをScopusGoogle Scholarで見る
[20]
J. Li, F. Zhao, Y. Wang, J. Chen, J. Tao, G. Tian, et al.
腸内細菌叢の異常は高血圧の発症に寄与する
マイクロバイオーム, 5 (1) (2017)
Google Scholar
[21]
B. ロドリゲス-イトゥルベ、H.ポンス、R.J.ジョンソン
高血圧症における免疫系の役割
Physiol Rev, 97 (3) (2017), pp.1127-1164
CrossRefView Record in ScopusGoogleスカラー
[22]
S. 北本 浩之、長尾 浩之、焦 毅、M.G.Gillilland、林 敦、今井 純一、他．
コンメンサル病原体が引き起こす大腸炎における口と腸の粘膜間部連結部
Cell, 182 (2) (2020), pp.447-462.e14
記事ダウンロードPDF表示ScopusGoogle Scholarで記録を見る
[23]
A.F. Andersson, M. Lindberg, H. Jakobsson, F. Bäckhed, P. Nyrén, L. Engstrand, et al.
バーコードパイロシークエンスによるヒト腸内細菌叢の比較解析
PLoS ONE, 3 (7) (2008), p. e2836
CrossRefView Record in ScopusGoogle Scholar
[24]
J.M. Macy、I. Yu、C. Caldwell、R.E. Hungate
ヒト消化管の生態系解析のための信頼性の高いサンプリング方法
Appl Environ Microbiol, 35 (1) (1978), pp.113-120
CrossRefView Record in ScopusGoogle Scholar
[25]
N.I. Chalmers, R.J. Palmer Jr., J.O. Cisar, P.E. Kolenbrander
歯垢からマイクロマニピュレーションしたStreptococcus sp.-Veillonella sp.群集の性状解明
J Bacteriol, 190 (24) (2008), pp.8145-8154
ScopusGoogle Scholarで記録を見る
[26]
F. アスニカー、S. マナーラ、M. ゾルフォ、D.T. トゥルーン、M. ショルツ、F. アルマニーニ、他。
ストレインレベルのメタゲノムプロファイリングによる母親から乳児への垂直的なマイクロバイオーム伝播の研究
mSystems, 2 (1) (2017年)
Google Scholar
[27]
S.S. Li, A. Zhu, V. Benes, P.I. Costea, R. Hercog, F. Hildebrand, et al.
糞便微生物叢移植後のドナー株とレシピエント株の耐久性のある共存状態
サイエンス（ニューヨーク州ニューヨーク），352（6285）（2016），pp.586-589
Google Scholar
[28]
A.C. Anderson, M. Rothballer, M.J. Altenburger, J.P. Woelber, L. Karygianni, K. Vach, et al.
異なる食餌フェーズに伴う口腔バイオフィルム微生物相の長期的変動
Appl Environ Microbiol, 86 (20) (2020)
Google Scholar
[29]
J. Wang, Z. Jia, B. Zhang, L. Peng, F. Zhao（王、賈、張、彭、趙
生体内ヒト口腔内細菌叢の蓄積を追跡し、消化管への入り口における微生物群集動態を解明
Gut, 69 (7) (2020), pp.1355-1356
CrossRefView レコードをScopusGoogle Scholarで見る
[30]
D.F. Kinane、P.G. Stathopoulou、P.N. Papapanou
歯周病
歯周病 Nat Rev Dis Primers, 3 (1) (2017)
Google Scholar
[31]
E. ムノス・アギレラ、J・スヴァン、M・オルランディ、Q・ミロ・カタリナ、J・ナルト、F・ダイオート
歯周炎と血圧の関連性が全身健康な個人で強調された。ネステッド・ケースコントロール研究からの結果
高血圧, 77 (5) (2021), pp.1765-1774
CrossRefGoogle Scholar
[32]
Munoz Aguilera E, Suvan J, Buti J, Czesnikiewicz-Guzik M, Barbosa Ribeiro A, Orlandi M, et al. Periodontitis is associated with hypertension: a systematic review and meta-analysis. Cardiovasc Res.2020;116（1）:28-39。
Google Scholar
[33]
P.A.モデスティ
季節、気温、血圧：複雑な相互作用
Eur J Intern Med, 24 (7) (2013), pp.604-607
記事ダウンロードPDF表示ScopusGoogle Scholarの記録
[34]
C.M.イフェグワジ、H.E.エグベリ、J.C.チュックウォルジ
感情反応と血圧上昇：メディエーターとしての不安
サイコル・ヘルス・メッド，23（5）（2018），pp.585-592
ScopusGoogle Scholarで記録を見る
[35]
P. ピニャテッリ、G.ファビエッティ、A.リッチ、A.ピアテッリ、M.C.キュリア
歯周病と一酸化窒素を減少させる口腔内細菌の存在が血圧にどのような影響を与えるか
Int J Mol Sci, 21 (20) (2020), p. 7538
CrossRefGoogle Scholar
[36]
M. ヘルマン、A.フラマー、T.F.リュッシャー
高血圧における一酸化窒素
J Clin Hypertens (Greenwich), 8 (12 Suppl 4) (2006), pp.17-29
CrossRef記録をScopusGoogle Scholarで見る
[37]
H.S. Alzahrani, K.G. Jackson, D.A. Hobbs, J.A. Lovegrove（アルザハラニ、ジャクソン、D.A. ホブス、J.A. ラブグローブ
食事性硝酸塩と口腔内マイクロバイオームが血圧と血管緊張に果たす役割
Nutr Res Rev, 34 (2) (2021), pp.222-239
CrossRefView Record in ScopusGoogleスカラー
[38]
C. Zhang, T. Zhang, W. Lu, X. Duan, X. Luo, S. Liu, et al.
肺高血圧症患者における気道微生物叢の組成の変化
高血圧症, 76 (5) (2020), pp.1589-1599
CrossRefView レコードをScopusGoogle Scholarで見る
[39]
B. Fauroux、N. Hart、S. Belfar、Michèle Boulé、I. Tillous-Borde、D. Bonnet、et al.
嚢胞性線維症患者における Burkholderia cepacia の肺高血圧症および死亡率増加との関連性
J Clin Microbiol, 42 (12) (2004), pp.5537-5541
ScopusGoogle Scholarで記録を見る
[40]
E.-Y. Choi, J.-Y. Jin, J.-I. Choi, I.S. Choi, S.-J. Kim
マウスマクロファージにおけるPrevotella intermediaリポポリサッカライド誘発インターロイキン-6産生に対するアジスロマイシンの影響
Eur J Pharmacol, 729 (2014), pp.10-16
記事ダウンロードPDFViewレコードin ScopusGoogle Scholar
[41]
J.M.Larsen
慢性炎症性疾患におけるプレボテラ菌に対する免疫反応
免疫学, 151 (4) (2017), 363-374ページ
CrossRefRecord in ScopusGoogle Scholarをご覧ください。
[42]
L. Jia, N. Han, J. Du, L. Guo, Z. Luo, Y. Liu
Toll-Like Receptorsを介した重要な病原因子の病原性について
Front Cell Infect Microbiol, 9 (2019), p.262
ScopusGoogle Scholarで記録を見る
[43]
A. Kostic、E. Chun、L. Robertson、J. Glickman、C. Gallini、M. Michaud、et al.
Fusobacterium nucleatumは腸の腫瘍形成を増強し、腫瘍-免疫の微小環境を調節する
Cell Host Microbe, 14 (2) (2013), pp.207-215
記事ダウンロードPDF表示ScopusGoogle Scholarでの記録
[44]
Y. 張、王、李、倪、杜、厳、F.
ヒト口腔内細菌叢とその変調による口腔の健康への貢献
Biomed Pharmacother, 99 (2018), pp.883-893
記事ダウンロードPDFViewレコードin ScopusGoogle Scholar
[45]
T. ヤン、E.M.リチャーズ、C.J.ペピン、M.K.ライザダ
高血圧と慢性腎臓病における腸内細菌叢と脳・腸・腎臓軸
Nat Rev Nephrol, 14 (7) (2018), pp.442-456
CrossRefView Record in ScopusGoogleスカラー
[46]
TaChung Yu、F. Guo、Y. Yu、T. Sun、D. Ma、J. Han、et al.
Fusobacterium nucleatumはオートファジーの調節により大腸癌の化学療法耐性を促進する
Cell, 170 (3) (2017), pp.548-563.e16
記事ダウンロードPDFViewレコードin ScopusGoogle Scholar
[47]
X. Zhang, D. Zhang, H. Jia, Q. Feng, D. Wang, D.i. Liang, et al.
関節リウマチでは口腔内および腸内細菌叢に異常があり、治療により一部正常化される
ナットメッド, 21 (8) (2015), pp.895-905
CrossRefView Record in ScopusGoogleスカラー
[48]
B. Flemer, R.D. Warren, M.P. Barrett, K. Cisek, A. Das, I.B. Jeffery, et al.
大腸がんにおける口腔内細菌叢は特徴的であり、予測的である
ガット, 67 (8) (2018), pp.1454-1463
CrossRefView Record in ScopusGoogleスカラー
[49]
Y. Wei, Y. Li, L.i. Yan, C. Sun, Q.i. Miao, Q. Wang, et al.
自己免疫性肝炎における腸内細菌叢の変化
Gut, 69 (3) (2020), pp.569-577
CrossRefView Record in ScopusGoogleスカラー
[50]
F. Zhu, Y. Ju, W. Wang, Q.i. Wang, R. Guo, Q. Ma, et al.
統合失調症に対する腸内細菌群の特徴のメタゲノム規模での関連性
Nat Commun, 11 (1) (2020)
Google Scholar
[51]
L.O. Lerman、T.W. Kurtz、R.M. Touyz、D.H. Ellison、A.R. Chade、S.D. Crowley、et al.
高血圧の動物モデル。米国心臓協会からの科学的声明
ハイパーテンション，73 (6) (2019)
グーグル スカラー
引用元: (0)
カイロ大学の責任で査読。

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これらの著者はこの論文に等しく貢献した。

© 2022 The Authors. カイロ大学を代表してElsevier B.V.が発行したものです。
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