母親の高脂肪食は成体児の気道感覚神経支配と反射性気管支収縮を増加させる

2023年8月31日 14:21

研究論文肥満の生理学
母親の高脂肪食は成体児の気道感覚神経支配と反射性気管支収縮を増加させる

https://journals.physiology.org/doi/full/10.1152/ajplung.00115.2023

ジーナ・N. ジーナ・N・カルコ、イェム・J・アルハリチ、ケイラ・R・ウィリアムズ、デビッド・B・ジャコビー、アリソン・D・フライヤー、アリーナ・マロヤン、謝振英
オンライン公開:05 JUL 2023https://doi.org/10.1152/ajplung.00115.2023
これは最終版です。
詳細
セクション
概要

図をダウンロードするパワーポイントをダウンロードする

肥満の母親から生まれた子供は喘息や気道過敏症を発症しやすいが、そのメカニズムは不明である。われわれは、肥満の母親から生まれたヒトにみられる代謝異常を再現する、母親の食事誘発性肥満のモデルマウスを開発した。高脂肪食（HFD）を与えたダムの子どもは、普通食（RD）しか与えていないにもかかわらず、16週齢で脂肪率の増加、高インスリン血症、インスリン抵抗性を示した。5-ヒドロキシトリプタミンの吸入によって誘発される気管支収縮も、高脂肪食（HFD）群では普通食（RD）群に比べて有意に増加した。増加した気管支収縮は迷走神経切断によって阻止され、この反射が気道神経によって媒介されていることが示された。16週齢の子孫から採取した気管の3次元（3-D）共焦点イメージングにより、上皮感覚神経支配とサブスタンスP発現の両方が、HFD-fedダムの子孫ではRD-fedダムの子孫に比べて増加していることが示された。我々は初めて、母親の高脂肪食が子孫の気道感覚神経支配を亢進させ、反射的な気道過敏性につながることを示した。

NEW & NOTEWORTHY 我々の研究は、母親の高脂肪食が子孫の喘息のリスクと重症度を増加させるという、新しい潜在的なメカニズムを明らかにした。マウスの母親が高脂肪食に暴露されると、気道知覚神経の過神経支配が起こり、普通食のみを与えた子供では反射性気管支収縮が亢進することを見いだした。これらの知見は臨床的に重要であり、喘息の病態生理に新たな知見を与えるとともに、この患者集団における予防戦略の必要性を強調するものである。

はじめに
世界の成人人口の約13％を占める6億5,000万人以上の成人が肥満と分類されている(1)。先進国では、妊娠中の女性の10人に3人が肥満である(2)。母親の肥満の影響は一世代にとどまらず、その後の世代の健康全般に影響を及ぼす可能性がある（3）。研究では、過体重や肥満の母親の子どもは、小児期およびその後の人生において、喘鳴や喘息などの呼吸器合併症を発症するリスクが高いことが示されている（4-6）。しかし、母親の肥満が子孫の喘息リスクを増加させるメカニズムは依然として不明であり、効果的な予防・治療戦略の開発を困難にしている。

神経機能障害は喘息の発症に重要な役割を果たしている。知覚神経は気道の上皮層に密に分布しており、刺激を感知して中枢神経系に情報を伝え(7)、副交感神経の遠心性神経が反射的に気管支収縮を引き起こす(8)。副交感神経は気道の緊張を調節し、ムスカリン受容体の作動薬であるアセチルコリンを放出し、平滑筋収縮と気管支収縮を刺激することで気管支収縮を誘導する(9)。この感覚神経と副交感神経を介した反射性気管支収縮は、メタコリン、ヒスタミン、冷気、運動、アレルゲンなど様々な刺激に反応して起こる。神経介在性気管支収縮の亢進は、抗原チャレンジ(9)、ウイルス感染(10)、オゾン暴露(11)、インスリン(12)など、試験されたすべての喘息動物モデルで観察されている。重要なことに、この反射は喘息患者でも亢進する(13, 14)。気管支鏡による生検を用いた最近の研究では、重症の喘息患者では感覚神経支配が有意に亢進していることが示された(15)。

肥満によるインスリン抵抗性と代償性高インスリン血症も、他の変数とは無関係に、ヒトの喘息リスクを増加させる可能性がある(16-18)。臨床データは、高インスリンレベルは肺機能を低下させることを示している(19, 20)。妊娠中の肥満は、ヒトや動物でみられるように、子孫にインスリン抵抗性や高インスリン血症を引き起こしやすくする（21）。さらに、我々は以前に、食事誘発性肥満の動物モデルにおいて、循環インスリンの増加が気道神経を介する気管支収縮を増強することを示した(12, 22, 23)。本研究では、ヒトによく見られる代謝異常を子孫に再現した高脂肪食誘発肥満モデルマウスを用いた(24)。このモデルを用いて、母親の肥満が子孫に高インスリン血症を引き起こし、それによって気道神経介在性気管支収縮が亢進するかどうかを検討した。

方法
倫理的配慮
すべての研究は、オレゴン健康科学大学のInstitutional Animal Care and Use Committeeによって承認されたプロトコル（TR01_IP00000251およびTR02_IP00000432）に従って実施した。

動物
野生型FVB/NJマウスをJackson Laboratoryから購入し、病原体のない施設で12時間の明暗サイクルで飼育した。マウスの母体肥満をモデル化するため、メスマウスを無作為に実験群に割り付け、6週齢から普通食（RD、脂肪由来14％kcal、LabDiet）または高脂肪食（HFD、脂肪由来45％kcal、Envigo）を8週齢まで、妊娠・授乳期を通じて与えた。高脂肪食の構成は以前にも報告されている(24)。食餌介入8週後、雌マウスをRDを与えた雄マウスと交配させ（図1A）、交配カップルに母動物用の食餌を与えた。雌のダムは妊娠中および授乳期を通じてそれぞれの食餌を続け、3週齢で離乳し、通常の食餌に切り替えた。体脂肪は核磁気共鳴法（EchoMRI, Houston, TX）を用い、既述の方法で測定した(23)。子マウスは生理学的測定や組織採取の前に一晩絶食させた（新生P1マウスを除く）。気管サンプルと腹部静脈からの空腹時血液を、指示された異なる時点で採取した。血糖はグルコメーター（OneTouch Ultra2, LifeScan, Inc.）血漿インスリンは酵素結合免疫吸着測定法（マウスインスリンELISA、10-1247-01、Mercodia、Winston-Salem、NC）で定量した。

図1.
キャプション
図をダウンロード PowerPointをダウンロード

In Vivoでの気管支収縮と気道抵抗の測定
マウスはケタミン（100mg/kg ip）とキシラジン（10mg/kg ip）を用いて麻酔し、気管切開し、呼気終末陽圧2cmH2Oで人工呼吸（100％酸素、0.2mL潮量、120回/分）した。マウスはまた、サクシニルコリン（20 mg/kg im）で麻痺させた。体温は直腸温度計でモニターし、ヒーティングパッドとランプで36℃～37℃に維持した。心拍数は心電図でモニターした。吸気流量はニューモタコグラフ（MLT1L、ADInstruments）で測定し、圧力は差圧トランスデューサー（MLT0670、ADInstruments）で記録した。データはPowerLab 4/SPアナログ・デジタル変換器を用いて記録し、LabChart Proソフトウェア（ADInstruments）を用いて解析した。

気道抵抗は既述の方法で測定した(25)。簡単に説明すると、2回の深い吸気の後、吸気ピークで225msの吸気休止を6回連続して行った。各呼吸について、ピーク圧と吸気終末圧（プラトー圧）の両方を記録し、抵抗はこれら4呼吸の平均（Ppeak-Pplateau）／吸気流量として計算した。次に、気道抵抗を、エアロゾル化生理食塩水または5-ヒドロキシトリプタミン（5-HT；10μL、10-300mM、Sigma Aldrich）のいずれかのエアロゾル化処置の前に、インラインネブライザーを介して測定し、処置の50秒後に測定した。治療により誘発された気管支収縮は、エアロゾルによるチャレンジ後の気道抵抗とチャレンジ直前の気道抵抗の差として計算され、単位はcmH2O・mL-1・s-1であった。投与間のベースライン回復を確実にするため、各投与の間に2回の深吸入を行った。気管支収縮に対する神経細胞の寄与は、迷走神経切開の有無にかかわらず、5-HTの増量吸入に対する気道抵抗の変化を比較することにより測定した（25）。

気道神経の組織光学的透明化と画像化および定量化
免疫染色、組織光学的透明化、共焦点顕微鏡、および気道神経のデジタル3次元（3D）再構築を含む技術の組み合わせを使用して、子マウスの気道上皮の感覚神経支配および全山気管におけるサブスタンスPの発現を評価した。P1を除く子孫マウスをリン酸緩衝生理食塩水（PBS）で灌流し、気管を切除してZamboni固定液（Newcomer Supply）で4℃、一晩固定した。気管を4％正常ヤギ血清、1％トリトンX-100、5％粉ミルクで2日間ブロックし、汎神経マーカータンパク質遺伝子産物9.5（PGP9.5、ウサギIgG、1:200；AMSBIO）およびサブスタンスP（ラットIgG2A、1:500；BD Pharmingen）に対する抗体と4℃の振盪器で一晩インキュベートした。洗浄後、組織を二次抗体（Alexaヤギ抗ウサギ647、1:1,000；InvitrogenおよびAlexaヤギ抗ラット555、1:1,000；Invitrogen）で一晩インキュベートし、核染色4′6-ジアミノ-2-フェニルインドール（DAPI、ジラクチネート；Molecular Probes）を用いて対比染色した。その後、気管をn-メチルアセトアミド／ヒストデンツ（Ce3D）中で12時間光学的に洗浄し（28）、Ce3D中で深さ120μmのイメージングウェル（Invitrogen、マサチューセッツ州ウォルサム）のスライドにマウントした。

画像はZEISS LSM900共焦点顕微鏡を用い、0.19 mmワーキングディスタンスで63/1.4 oil PlanApo DIC M27対物レンズを使用して取得した。サンプルは401nm、553nm、653nmの光を照射し、画像はZスタックとして取得した。上皮の位置を特定するためにDAPIを用いて、各マウス気管について無作為に2～3枚の画像を撮影した。

気道上皮神経および神経性サブスタンスP発現の定量化
気道神経は、Imaris半自動フィラメントトレースソフトウェア（Imaris 9.7、Oxford Instruments）を用いて3D画像でモデル化した。気管上皮神経の周囲に3Dフィラメントモデルを作成し、画像ごとに神経の長さと分岐点の数を定量化した。神経細胞のサブスタンスP発現は、サブスタンスP陽性ボクセルの周囲に表面を作成し、Imarisソフトウェアを用いてPGP9.5陽性神経軸索モデルと接触しているボクセルの体積をコロカライズすることにより定量化した。三次元画像におけるサブスタンスPの総発現量を単位ボクセルで測定した。サブスタンスP発現を神経細胞数に正規化するため、サブスタンスPボクセルとPGP9.5ボクセルの比率を算出した。1匹のマウス気管につき2～3枚の画像を定量し、2～3枚の解析画像から得られた平均値を各個体の代表データとみなした。実験は盲検下で行われ、サンプル名は隠され、数値ラベルに置き換えられた。そのため、画像の撮影とデータ処理を担当した者は、サンプルの本当の身元を知らないままであった。客観性を維持し、バイアスを排除するため、身元は終了後にのみ明らかにされた。

統計分析
本研究では、身体測定データについては、一元配置分散分析（ANOVA）およびボンフェローニポストホックテストを用い、気管支肺胞洗浄（BAL）および血球数、気道神経の長さ、分岐点については、対にしないスチューデントのt検定を用い、吸入ネブライズマタコリンおよびセロトニンに反応する気道抵抗については、二元配置反復測定ANOVAを用いた。P値は0.05未満を統計的に有意とみなした。データは、GraphPad Prism 8ソフトウェア（GraphPad Software, La Jolla, CA）を用いて解析した。結果は平均値±SEで表した。

結果
高脂肪食を与えた母親の子孫における代謝異常
妊娠8週前から高脂肪食を与えた雌マウスは、体重に有意な変化はみられなかったが（図1B）、私たちの以前の報告（24）と一致し、普通食を与えた雌マウスと比較して内臓脂肪率が有意に高かった（データは示さず）。しかし、高脂肪食を妊娠中も続けると、通常食と比較して妊娠時体重増加（子牛の大きさで正規化）が大きくなった（P < 0.1、図1C）。

離乳後は普通食のみを与えたにもかかわらず、高脂肪食を与えたダムの16週齢の雄の子供は、普通食を与えたダムの子供（丸印）と比較して、体重（図2A、四角）と体脂肪率（図2B）が有意に増加し、除脂肪体重（図2C）が減少した。雌の子では、体脂肪率は母親の食餌に影響されなかったが（図2B）、体重（図2A）は高脂肪食のダムの子（下向き三角形）で普通食のダムの子（三角形）に比べて増加していた。また、高脂肪食を摂取しているダムから生まれた子供では、男女ともに空腹時グルコース（図2D）に変化はないが、高インスリン血症（図2E）とインスリン抵抗性（インスリン抵抗性の恒常性モデル評価（HOMA-IR）図2F）が観察され、これは我々が以前に発表した肥満の母親から生まれたヒトの赤ちゃんのデータ（29）と同様であった。

図2.
キャプション
図をダウンロードパワーポイントをダウンロード

全体として、我々の知見は、妊娠前および授乳期の母親の高脂肪食が、離乳後に通常の食事を与えても、特に男性において、子孫の代謝機能障害を引き起こすという疫学的データを再現するものである。

肥満の母親の子供では気道神経を介した反射性気管支収縮が増加する
次に、16週齢の麻酔、人工呼吸、麻痺マウスで気道抵抗を測定した。異なる濃度の5-ヒドロキシトリプタミン（5-HT、10-300mM、10μL）吸入に対する反応を記録し、迷走神経切断前（図3A）と切断後（図3B）、またはムスカリン受容体拮抗薬アトロピン（3mg/kg、iv）投与後に比較し、気管支収縮に対する迷走神経反射の寄与を測定した。

図3.
キャプション
図をダウンロード PowerPointをダウンロード

迷走神経切断前（図3A）、高脂肪食を摂取したダムの子供は、通常の食事を摂取したダムの子供と比較して、吸入した5-ヒドロキシトリプタミンに反応して気管支収縮が用量依存的に有意に増加した。5-ヒドロキシトリプタミンによって誘発された気管支収縮は、迷走神経切断術（図3B）またはアトロピン（3mg/kg、ip；データは示さず）によって完全にブロックされたことから、気道神経を介した反射性気管支収縮が観察された効果の原因であることが示された。注目すべきことに、母親の食事はベースラインの気道抵抗を変化させなかったが（図3A）、気道神経を介した反射性気管支収縮を増強した。気道抵抗に関しては、オスとメスの間に有意差は観察されなかった。

肥満の母親の子孫における気道上皮神経支配と神経細胞性サブスタンスP発現
気道上皮知覚神経は、汎神経マーカーPGP9.5に対する抗体による免疫染色（図3、CおよびD）および3次元モデリング（図3、GおよびH）により可視化した。気道上皮では、感覚神経の長さ（図3K）と神経の分岐点の数（図3L）の両方が、高脂肪食を与えたダムの1日齢の子では、普通食を与えたダムの子に対して有意に減少していた。この神経密度の低下は、母体の高脂肪食への子宮内曝露が気道知覚神経の発達を抑制することを示している。しかし、16週齢になると、高脂肪食を与えたダムの子どもでは、長さ（図3O）と分岐（図3P）の両方が、普通食を与えたダムの子どもに対して有意に増加した。

高脂肪食への子宮曝露が、気管支収縮を誘発し喘息の重症度と関連することが知られている神経ペプチドである感覚物質Pの発現を変化させるかどうかを調べるため、神経伝達物質サブスタンスPを汎神経マーカーPGP9.5と共局在化させることにより、サブスタンスPの神経細胞発現を同定した（図3、EおよびF）。サブスタンスP発現をニューロン数で正規化するため、サブスタンスPボクセルとPGP9.5ボクセルの比を計算した（図3、IおよびJ）。出生直後は、測定された神経細胞サブスタンスP発現の総量（図3M）もPGP9.5に対するサブスタンスPの比率（図3N）も、母親の高脂肪食や普通食によって有意な変化は見られなかった。しかし、16週齢になると、神経細胞サブスタンスPは、高脂肪食を与えたダムの子どもでは普通食に比べて有意に増加した（図3Q）。さらに、サブスタンスPのPGP9.5に対する比も、高脂肪食を与えたダムの子どもでは、普通食を与えたダムの子どもに対して有意に増加した（図3R）。

考察
母親の高脂肪食誘発性肥満のマウスモデルを用いた本研究は、母親の高脂肪食曝露が子孫の喘息リスクを増加させる可能性を示す証拠の増加に加わった。具体的には、母親の高脂肪食は、通常の食事のみを与えた場合でも、循環インスリン、気道上皮感覚神経支配、反射性気管支収縮を増加させることがわかった。成体動物におけるこれまでの知見から、高インスリン血症は感覚神経の支配を亢進させ、副交感神経の活動を亢進させることにより、気道神経を介する気管支収縮を増大させることが示されている(12, 22, 23, 30)。高インスリン血症は神経の成長を促進する。生理的レベルのインスリンは、軸索の成長と再生を促進することによって感覚ニューロンに直接作用するからである（31）。さらに、我々は、高インスリン血症が、知覚神経上のインスリン受容体によって活性化されるシグナル伝達経路を介して、気道上皮の知覚過緊張を誘導することを確認した(30)。さらに、高インスリン血症は、精管や心房心筋細胞で観察されるように、M2受容体の発現を低下させることによって肺機能の副交感神経制御を変化させ（32、33）、それによって副交感神経上のM2受容体の機能を抑制する（12、34）。したがって、循環インスリンの増加は、気道知覚神経と副交感神経の両方に影響を及ぼし、最終的に気道神経を介した反射性気管支収縮の増加につながる可能性がある。したがって、今回の結果は、これまでの研究結果とともに、母親の肥満が子孫の喘息発症に寄与する可能性のあるメカニズムを示唆している。

われわれのデータは、子宮内肥満に暴露された子孫における5-HTに対する過敏性は、感覚神経と副交感神経の両方の変化によって増大する可能性のある神経反射によって媒介されることを確認した。我々のデータは、母親の高脂肪食曝露が、気道上皮における感覚神経の密度を増加させたことを示している。これらの高められた感覚神経は、気道の伸張や化学物質などの刺激を感知することができ、それによって中枢神経系により強い信号を伝達することができる。その結果、副交感神経の活性化が高まる。副交感神経は気道の緊張をコントロールし(35)、アセチルコリンの放出を通じて気管支収縮を媒介する(9, 36-39)。アセチルコリンはまた、機能前抑制性のM2ムスカリン受容体を活性化する(1, 8, 15)。M2受容体の機能または発現が失われると、アセチルコリン放出と反射性気管支収縮が増加する。さらに、重症の喘息患者では、気道上皮の感覚神経支配が著しく亢進しており、炎症モデルや疼痛モデルにおいて感覚神経の感受性を亢進させることが知られている神経ペプチドであるサブスタンスP（15）の発現が増加している（40, 41）。ここで我々は、母親の高脂肪食曝露が、16週齢の子供の気道上皮でサブスタンスPを発現する知覚神経を増加させることを見出した。増加したサブスタンスPは、気道平滑筋上のニューロキニン-1（NK1）受容体に直接結合するか（42）、あるいは神経原性炎症（43）を介して間接的に神経機能を増強し、高脂肪食を与えたダムの子孫で観察された神経反射性気管支収縮の増加に寄与する。

16週齢の子における気道上皮知覚神経の過神経支配は、母親の高脂肪食への子宮内曝露が1日齢の子における気道知覚神経の発達を遅延させたことを考えると、胚発生中の変化によるものとは考えにくい。高脂肪食によって誘発される母親の肥満は、神経系の成長と発達を妨げるいくつかの因子を引き起こし、その結果、神経支配が低下する。例えば、高脂肪食は胎盤や胎児組織を含む体内の酸化ストレスを増加させ、神経細胞を傷つけ、その成長を妨げる可能性がある。母親の食事における微量栄養もまた、発育中の胎児の神経の成長、髄鞘形成、および全体的な健康に寄与する。ビタミンB1（チアミン）、ビタミンB6（ピリドキシン）、ビタミンB12などの神経栄養ビタミンB群が、神経細胞の代謝や神経細胞の興奮性において重要な役割を果たしていることが、これまでの研究で明らかになっている(44)。さらに、ビタミンEは脂質の過酸化と相互作用し、神経分化時の欠陥を防ぐことが分かっている(45)。本研究では、高脂肪食（HFD）と対照食との間で微量栄養素レベルの違いが観察されたが、本研究には限界があるため、微量栄養素が神経の発達に及ぼす影響を明確に否定または確認することはできないことに注意することが重要である。この関係を調査・検証するためには、本研究の範囲を超えてさらなる研究が必要である。さらに、母親の肥満は慢性炎症とホルモン変化を引き起こし、神経系の発達にさらに影響を及ぼす可能性がある。エピジェネティックな変化も神経支配に悪影響を及ぼす可能性がある。これらのメカニズムを調べるためには、今後さらなる研究が必要である。とはいえ、本研究は、胎児および新生児の末梢神経系の発達に対する母親の栄養状態の潜在的影響について貴重な知見を提供し、この分野における継続的研究の必要性を強調するものである。

我々の知見から、母親の高脂肪食曝露は成体子孫の循環インスリン濃度を上昇させ、これが喘息リスク上昇の根底にある可能性が明らかになった（16, 46）。ヒトを対象とした2つの横断研究では、高インスリン値と喘息の重症度（47）および肺機能の低下（19、20）との間に正の相関関係があることが示されている。動物実験でも、インスリンレベルの上昇は、副交感神経上のM2ムスカリン受容体の発現（32、33）と機能を低下させ（12）、神経を介する気管支収縮を増強することが示されている。ストレプトゾトシン(12,22,23)によるインスリン分泌の抑制や抗糖尿病薬(22,23)による治療によって循環インスリン濃度を低下させると、肥満動物における神経介在性過敏反応が抑制されることが示されている。ストレプトゾトシン投与ラットでインスリンを補充すると、神経媒介性過敏症が回復する(12, 48)。さらに、インスリンには神経栄養作用があり(49)、気道上皮知覚神経の過神経支配を引き起こし、本研究では神経サブスタンスPの発現を亢進させ(図3、C-N)、反射性気管支収縮を亢進させた(図2、AおよびB)。気道知覚神経上のインスリン受容体を選択的に枯渇させると、高インスリン血症動物において、高インスリン血症誘発性の知覚神経亢進と反射性亢進が抑制されることが示されている(30)。したがって、肥満ダムを持つ子供における高インスリン血症の発症（図2）は、母親の肥満が子供の喘息発症に寄与するメカニズムを示している可能性がある。

肥満は21世紀における最も差し迫った公衆衛生上の課題の一つである。衝撃的なことに、米国における妊娠前の肥満の有病率は、2019年には29％に上昇した(2)。特に懸念されるのは、母親の肥満の影響が単に一世代を対象とするのではなく、栄養過多の母親の胎児が経験する栄養素の増加は、肥満の世代間サイクルの基礎であり、喘息リスクの上昇を含む、子孫の広範な負の健康転帰に関連していることである。われわれのデータは、母親の食事と妊娠前および妊娠中の体重増加をコントロールすることで、子孫の喘息を予防できる可能性を示唆している。さらに、感覚神経密度が出生後に増加するため、子孫の感覚神経の発達を制限し、喘息発症リスクを抑制する機会の窓が存在する可能性がある。全体として、今回の知見は、母親の肥満とそれが子孫の健康に及ぼす影響の問題に取り組む継続的な努力の必要性を強調するものである。

データの利用可能性
データは合理的な要求があれば入手可能である。

助成金
本研究は、米国国立衛生研究所-国立心肺血液研究所（NHLBI）助成金HL163087（Z.N.へ）、HL164474（Z.N.へ）、HL131525（A.D.F.へ）により財政的支援を受けた。 National Institute of Allergy and Infectious Diseases Grant AI152498（D.B.J.へ）、NHLBI Grants HL144008（D.B.J.へ）およびF30HL154526（G.N.C.へ）、National Institute of Child Health and Human Development Grant HD099367（A.M.へ）。

免責事項
金銭的、その他を問わず、著者らは利益相反を宣言していない。

著者貢献
D.B.J.、A.D.F.、A.M.およびZ.N.が研究の着想と設計を行い、G.N.C.、Y.J.A.、K.R.W.およびZ.N.が実験を行い、G.N.C.、K.R.W.、A.M.およびZ.N.がデータの解析を行い、G.N.C.、A.M.およびZ.N.が実験結果の解釈を行った、 A.M.およびZ.N.は図の作成、A.M.およびZ.N.は原稿の草稿、D.B.J.、A.D.F.、A.M.およびZ.N.は原稿の編集・改訂、G.N.C.、Y.J.A.、K.R.W.、D.B.J.、A.D.F.、A.M.およびZ.N.は原稿の最終版を承認した。

謝辞
実験の実施とデータ収集において、Elysse Phillips、Matthew Bucher、Jessica Maungが技術的な支援をしてくれたこと、動物の体組成測定においてDaniel Marks博士とXinxia Zhu博士がサポートしてくれたこと、イメージングとモデリングにおいてStefanie Kaech Petrie博士とBrian Jenkins博士が技術的な支援をしてくれたことに感謝する。彼らの貴重な貢献は、本研究の成功に不可欠であった。画像はBioRender.comで作成し、許可を得て掲載している。

著者メモ
通信： Z. Nie (niez@ohsu.edu)。
PDFをダウンロード
前へトップに戻る次へ
戻る
アラート登録
サインアップ
アメリカ生理学会

この記事が気に入ったらサポートをしてみませんか？