臨床検査技師国家試験対策ノート　尿　蛋白

化学的検査法

蛋白質

1日の排泄量は40～80㎎で100㎎を超えることはない　　

尿が酸性になると全体として+に荷電し、アルカリ性になると-に荷電する　

等電点ではあるＰＨで陽陰の両イオンがちょうどつりあって、全体として電気的中性を示す　

前処理として、アルカリ性ならば3～5％酢酸数滴を加えて弱酸性にしておく

蛋白質定性、半定量法

1　煮沸法

アルブミンやグロブリンが熱により変性を起こし、凝固沈殿する。

アルブモースなどで陽性にならない

あまり鋭敏でないため、これで陽性なら蛋白尿として断定してよい

2　スルホサリチル酸法（SSA）

酢酸酸性尿に20g/dlのスルホサリチル溶液を加え、白濁を生じれば陽性

最も鋭敏な方法で、これで陰性なら確実に蛋白－

強アルカリ性、強酸性では偽陰性になることもある（弱酸性が１番よい）

薬剤（ペニシリン系、経口糖尿病薬）やX線造影剤が混入した尿では偽陽性となる

3　試験紙法

試験紙法は、クエン酸緩衝液（PH3）を含み、PH指示薬TBPB（テトラブロムフェノールブルー）の蛋白誤差を利用して、グロブリンよりアルブミンを特異的に検出する。

試験紙法で陽性2+の表示はアルブミン濃度100㎎/dlである

起立性蛋白尿（生理的蛋白尿）は試験紙法で検出できる

強アルカリになると偽陽性、強酸性で偽陰性

アスコルビン酸の影響を受けない

検出感度は15～30㎎/dl

蛋白質定量法

1　比濁法

キングスベリークラーク法

スルホサリチル酸法と同じ原理であり、尿中にスルホサリチル酸法を加えてよく混濁し、10分静置後、660nmで測定する。　　　　　　　　　　　　　30～100㎎/dlの間はほぼ直線を描いているので正確な値が得られるが、30㎎/dl以下および100㎎/dl以上のところで不正確である。よって、蛋白濃度の高い尿は希釈する必要がある。

2　色素法

ピロガロールレッド・モリブデン錯体発色法（PO法）

ピロガロールはモリブデン酸と結合して赤色の錯体を形成する。これは470nmに極大吸収があるが、酸性水溶液中で蛋白と結合すると青紫色を呈し、極大吸収波長が604nmに移行する。

蛋白種による反応差が小さく、アルブミン100％にたいしてグロブリン80％くらいである。

クマシーブリリアントブルーG－250（CBBG-250）

色素CBBG-250酸性水溶液中で460nmに極大吸収があるが、蛋白と結合して錯体を形成すると590nmに移行する

蛋白種による反応差が小さく、アルブミン100％にたいしてグロブリン60％くらいである。

特殊蛋白体

ベンズジョーンズ蛋白

骨髄で生成される免疫グロブリンのL鎖で、50～58℃で凝固し、100℃で再び溶解する。

スルホサリチル酸法で著明に陽性になる

多発性骨髄腫、骨肉腫、リンパ性白血病などの場合に尿中に出現する。

Putnum法

①透明尿に酢酸緩衝液を加えてPhを4.9±0.1に調整する

②56℃の水溶中で15分間加温する。

③白濁あるいは沈殿を生じたらさらに煮沸水溶液中で3分間加熱し、白濁あるいは沈殿が消失または減少すれば陽性とする。

Bence Jones蛋白の検査資料として遠心後の上清部分を用いる

アルブモース

蛋白質の最初の分解産物で、肝疾患に際して尿中に出現することが多いが、組織崩壊の激しい癌、肺結核などでもみられる

酢酸、硝酸、スルホサリチル酸を加えると沈殿し、加温により溶解するが、冷却（70℃）にすると再び沈殿する。