旧ウイルスとワクチン両方のスパイクタンパクは、異常プリオンを生産する可能性が有る
SARS-CoV-2 Spike Protein in the Pathogenesis of Prion-like
Diseases
SARS-CoV-2スパイクタンパク質のプリオン様病態への関与について
Stephanie Seneff 1,* , Anthony M Kyriakopoulos 2 , Greg Nigh 3 , Peter A McCullough 4
【 解説 】
先日書いた記事から参照されていた論文です。
いくつかの重要なポイントを指摘されています。
SARS-COV2のスパイクタンパクにはプリオン様タンパクが有り、それはワクチンから生産されるスパイクタンパクも同様である
タンパク質の折り畳みミス（ミスフォールディング）によってヤコブ病やアルツハイマーなどの神経変性疾患を引き起こす
ｍRNAを取り込んだ細胞は、RNAを含むエクソソームを放出する
そのエクソソームを受け取った細胞はRNAからタンパク質を生産する
脾臓の免疫細胞がmRNAを迷走神経に沿って脳に送り、スパイクタンパク質の合成を始める
mRNAをDNAに逆転写し、プラスミドに保存している可能性がある
プリオン様タンパク質が脳内でタンパク質のミスフォールディングを引き起こし、神経変性疾患を引き起こす
エクソソームは、プリオンの新規かつ効率的な伝達方法である
オミクロンは、プリオン様タンパク質が大幅に低下していて病原性が小さい
RNAを含むエクソソームが放出されるという記述を見て、シェディングが思い出されました。
オミクロンには、プリオン様タンパクが無いのに、現在使用している２価ワクチンには、武漢１スパイクタンパクのプリオン様タンパクが入っていることになります。
ワクチン由来の新型ヤコブ病は、あまりに進行が早いので、ヤコブ病と思われず、アルツハイマーとして診断されているケースも有ると考えられます。
以下、本文の翻訳。
要旨
プリオンタンパク質とプリオン様タンパク質のミスフォールディングは、多くの神経変性疾患の原因として広く認識されており、その数は増え続けている。
ここでは、SARS-CoV-2のスパイクタンパク質が、プリオン様タンパク質の特徴として確立されている拡張アミノ酸配列を含んでいるという説得力のある証拠を要約する。
このことは、ワクチンによるスパイク蛋白の産生がプリオン様蛋白の産生と同義であることを示唆しており、これらの蛋白が体内を通過し分布することが予想される様々な経路の一部を追跡するものである。
その結果、頻度が高くなると予想される、非常に気になる生物学的影響について説明する。具体的には、神経炎症と神経変性疾患、血管系での凝固障害、広く普及しているインスリン抵抗性の文脈でのプリオンタンパク質の制御の抑制、およびその他の健康障害を誘発することが予想されるスパイクタンパク質のプリオン様特性による寄与について説明します。
これらのプリオン様特性が、SARS-CoV-2の自然感染よりも、ワクチンで再活性化したmRNA誘導型スパイク蛋白に関連性がある理由を説明する。
最後に、いくつかの不吉な公衆衛生上の意味と、これらの可能性を調査するための勧告を述べる。
イントロダクション
プリオン病は、伝達性海綿状脳症（TSE）とも呼ばれ、動物およびヒトを侵す、まれで一貫して致命的な脳疾患の一群である。 プリオン病は「タンパク質の感染性粒子」によって引き起こされ、生物による古典的な感染がなくても、病気の拡大を促進することができます。
狂牛病（牛海綿状脳症）、羊のスクレイピー、鹿の慢性消耗病（CWD）などが知られている。ヒトのプリオン病は、クロイツフェルト・ヤコブ病（CJD）と呼ばれ、常に致死的である。
致死性家族性不眠症（FFI）は、プリオンタンパク質の特定の変異によって引き起こされる非常に稀な致死性の遺伝病です。
一般に、プリオンタンパク質の自然な折り畳み型はPrP Cと呼ばれ、ミスフォールド型はPrP SC（「スクレイピー」の意）と呼ばれる。
病気の伝播は、外部にあるミスフォールドしたプリオン蛋白質（PrP SC）が感染源となり、神経細胞に発現する同じ蛋白質のミスフォールドを促進するという、触媒的プロセスによって行われる。現在では、プリオンタンパク質の可溶性オリゴマーの中間型が毒性物質であり、不溶性プラークは可溶性オリゴマーの除去につながるという点で保護的であると一般に認識されている[1]。
プリオン病は、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症（ALS）などの神経変性疾患を包含する一般化したものであることが明らかになりつつあり、これらの疾患にもプラークやレビー小体に蓄積するミスフォールドしたプロテインが関連している。
これらのタンパク質は、アムイロイドジェニックと呼ばれているが、「プリオン様」とも呼ばれており、その広がりは、古典的なプリオンタンパク質（PrP）の厳格な定義と重複する性質を持っている可能性がある[2,3]。
例えば、ALSに関連してミスフォールドするタンパク質であるTDP-43（TAR-DNA binding protein of 43 kDa）は、プリオン様様式で細胞間を伝播する凝集体を形成することが、研究者によって明らかにされつつある[4]。タンパク質の凝集体は、少なくとも3つの異なるメカニズムによって、ある細胞から別の細胞へと伝達される。ナノチューブのトンネル、na-ked凝集体としての分泌、エキソソームなどの細胞外小胞へのパッケージングなどである。
注目すべきは、細菌のプラスミド開始タンパク質であるRepAが、細胞内にアミロイドオリゴマーを構築し、神経変性におけるヒト細胞のミトコンドリア障害と同様に、細菌の致死的カスケードを誘発するという研究である[5]。この研究では、野生型RepAを発現するように操作されたマウス神経芽細胞腫細胞株を用いて研究を行った。
彼らは、変異型RepAに由来するin vitroで組み立てられたアミロイド繊維が神経芽腫細胞に感染し、細胞内に既に存在する野生型RepAにアミロイド性を伝播させることによって、細胞毒性を持つアミロイド粒子の形成を誘導することを実証することができた。
この結果に基づいて、これらの著者らは、"プリオン生物学の根底にある中心的な原則 "を次のように述べた。
「あるプリオン様タンパク質の生物学的起源が何であれ、それは系統的に無関係な受信者細胞に伝達することができ、受信者細胞が可溶性タンパク質を発現していれば、その上に入力タンパク質が容易にそのアミロイド構造をテンプレート化できる」。
[5]. 彼らは、プリオン様タンパク質凝集体の細胞間交換は、一般的な現象であると述べている。
スパイクタンパク質はプリオン様である
COVID-19 mRNAワクチンは、SARS-CoV-2スパイク糖タンパク質をコードするmRNAを含む脂質ナノ粒子をベースにしています。
このワクチンは、mRNAの内容物を分解から保護し、それをトランスフェクトした細胞が長期間にわたって高い生産速度で大量のスパイクタンパク質を生産することを保証するために、いくつかの方法で設計されている[6]。
バイオインフォマティクスを用いた包括的な研究により、多様な生物種から、遺伝子配列にプリオン様シグネチャーを持つ多数のウイルスタンパク質が同定された。
特に、受容体との結合や宿主細胞との融合に関与するウイルス表面タンパク質にプリオン様ドメインを同定した[7]。
これらの同じ著者らは、後にスパイクタンパク質のプリオン様潜在能力を分析した論文を発表している。
彼らは、SARS-COV-2スパイクタンパク質の受容体結合ドメイン（RBD）に、オリジナルのSARS-CoVウイルスにはなかった「プリオン様ドメイン」を発見したのである。
アスパラギン（Q）とグルタミン（N）に富む領域は、多くのプリオンタンパク質の特徴である。SARS-CoV-2変異体では、SARS-CoVと比較して5つのアミノ酸が置換されており、疎水性のQ/Nリッチ領域が形成され、プリオン形成が可能であることがわかった。彼らはまた、SARS-CoV-2変種のいくつかを分析し、Delta変種がオリジナルのWuhan株よりもプリオン形成のスコアが高く、一方Omicronは大幅に低いスコアであったことを明らかにした[8]。
グルタミン酸アスパラギンリッチ領域（QNR）は、制御分子やRNA結合タンパク質で頻繁に発見されており、アルツハイマー病、ハンチントン病、ALSなどの神経変性疾患に関連するタンパク質と関連しています[9]。 スパイクタンパク質のアミロイド形成能を評価する研究では、SARS-CoV-2スパイクタンパク質がタンパク質分解後にアミロイド様フィブリルを出現させることを、理論的および実験的手法で検証しています。
理論的な予測により、スパイクタンパク質の中にアミロイドを形成する可能性のある7つの配列が同定された。このタンパク質をプロテアーゼである好中球エラスターゼとインキュベートした実験では、24時間のインキュベーションでアミロイド様線維が出現することが確認された。
特定のセグメント、スパイク194-213（FKNIDGYFKI）は6時間後に非常に多く、それは理論的に同定された最もアミロイド原性の高い配列とほぼ完全に重なっていた。免疫活性化に反応した好中球は、好中球エラスターゼを培地に放出し、そこでスパイクタンパク質を入手し、アミロイド原性セグメントに分解することができるだろう[10]。
レビー小体は、パーキンソン病やその他の神経変性疾患に関連して脳に蓄積するタンパク質の塊である。2022年に発表された研究では、スパイクタンパク質がアミロイド生成タンパク質、特にパーキンソン病（PD）の原因因子であるαシヌクレインと相互作用し、細胞株でレビー小体様病変を誘導することが実験的に見出されました[11]。
また、α-シヌクレインの発現を上昇させることも確認されました。この特性は、COVID-19とPDの関連性を説明する基本的なメカニズムである可能性が示唆されました[12]。リュック・モンタニエ教授は、ヒト免疫不全ウイルス（HIV）の研究でノーベル賞を受賞し、最近亡くなられました。
モンタニエ博士の共著によるプレプリント論文には、COVID-19ワクチンの接種直後にCJDの自然発生的な症状で重症化した26例が記載されている。
26例のうち23例は、mRNAワクチンの2回目の注射から15日以内に症状を呈した。他の3例はアストラゼネカのDNAベクターワクチンに関連したもので、症状は最初の1カ月以内に出現した。26人のうち、論文執筆時点で20人が死亡し、残りの6人は危篤状態であった。死亡までの平均時間は、ワクチン接種後5ヶ月未満であった[13]。
CJDは非常に稀な疾患で、通常、生涯で100万人に1人しか発症しない。
また、通常、症状が現れてから死亡するまで数年かかる。したがって、これは明らかに極めて珍しいタイプのCJDであり、これらのワクチンの安全性について懸念を抱かせるものである。
脾臓の中心的役割
1979年の時点で、スクレイピーのプリオン蛋白をマウスに投与すると、腹腔内投与、静脈内投与、多回皮下投与のいずれの経路でも、常に同じパターンの感染拡大が見られることが認識されていた。
脾臓での伝播は、脊髄への顕著な広がりが見られるようになるかなり前に一貫して現れ、脳での感染性は最も長い潜伏期間を必要とした。
結論として、感染力の伝播は、血管やリンパ系を経由するよりも、主に神経に沿って起こることがわかった[14]。
神経系で高発現し、他の多くの組織では発現レベルが低いPrPとは異なり、アミロイド前駆体タンパク質（APP）mRNは、筋肉、肝臓、免疫系（胸腺と脾臓）、その他多くの臓器など神経系以外の多くの組織で高発現する[15, 16]。 注射後のワクチンからのmRNAの生体内分布を調べる研究は、ごくわずかしか行われていません。2017年に発表された研究では、マウスの筋肉に注射した後の、インフルエンザヘマグルチニンタンパク質をコードするmRNAの分布を追跡しました。
彼らは、さまざまな臓器で見つかったmRNAの最大レベルを定量化し、このデータを使用してmRNAの移動経路を推測しました。予想通り、筋肉に最も高い濃度（5,680 ng/mL）が残っていたが、近位リンパ節にもかなりの量（2,120 ng/mL）が認められ、遠位リンパ節にはかなり少量（177.0 ng/mL）であった。
臓器の中では、脾臓と肝臓の濃度が圧倒的に高かった（脾臓で86.9 ng/mL、肝臓で47.2 ng/mL）。血漿 (5.47 ng/mL), 骨髄 (3.35 ng/mL), 回腸 (3.54 ng/mL), 精巣 2.37 ng/mL と少量で、脳 (0.429 ng/mL) など他の多くの臓器では微量だった [17]． 別の研究では、ラットに筋肉内投与された狂犬病 mRNA ワクチンの生体内分布経路を追跡しました。
その結果、mRNAは1日以内に排出リンパ節に出現し、血液、肺、脾臓、肝臓でも確認された[18]。 T細胞の活性化とB細胞による抗体産生は、主にリンパ節と脾臓の胚中心で行われるため、この技術の開発者は、mRNAがリンパ系と脾臓に現れることを喜んでいる[19]。
エクソソームとマイクロRNA
エクソソームは、30-150nmの大きさの膜状の分泌ナノ小胞で、多くの場合、ストレス条件下ですべての細胞によって生成、放出されます。この細胞外小胞は、後期エンドソームにおいて、エンドソーム膜の内側への出芽により生成される。
核酸、タンパク質、脂質、代謝物など多様な物質を内包している。
シグナル伝達分子、栄養物、毒素などの内容物を介して、近接および遠距離の細胞間コミュニケーションを仲介する。
特に、脂質膜は、細胞外のリボヌクレアーゼによる分解から、内在化したRNA分子を保護することができる。2021年にWeiらによって発表された論文は、タンパク質、RNA、および他の分子をエキソソームに仕分けして他の細胞に輸出・送達することを制御する複雑なメカニズムについて優れたレビューを提供している[20]。
mRNAワクチンのナノ粒子からmRNAを取り込んだ細胞は、mRNAの一部をイオン化可能なカチオン性脂質とともに小さな脂質粒子にパッケージングし、エクソソームとして外部媒体に放出することが、実験的に示されている。 （訳注：シェディング？）
実際、著者らは、放出されたエクソソームにおいて、カチオン性脂質分子とヌクレオチドの比率が1対1であることを見いだした[21]。
また、彼らは、エクソソームを取り込んだ細胞が、エクソソームに含まれるmRNAからタンパク質を合成できることも実証している。
この実験は、ヒトエリスロポエチンをコードするmRNAを対象としていたが、COVID-19ワクチンのスパイクをコードするmRNAでも同様の結果が期待できる。
理論的には、脾臓の免疫細胞がスパイクタンパク質をコードする無傷のmRNAを迷走神経に沿って脳に送り、脳のニューロンやミクログリア細胞がそのmRNAを取り込んでスパイクタンパク質の合成を始めることができるということになる。
さらに、2019年に発表されたマウス研究で、腸内でミスフォールドしたαシヌクレインが迷走神経を介して脳に届けられ、パーキンソン病を引き起こすことがドラマチックに示された。
迷走神経切断術は、腸から脳への伝達からマウスをcom-pletely保護しました[22]。 米国ワクチン有害事象報告システム（VAERS）は、米国政府が運営するワクチン安全性監視プログラムであり、医療従事者や患者は、自分が受けたあらゆるワクチンに関連すると考えられる有害事象の事例を提出することができます[23]。
VAERSのデータ分析では、迷走神経および/または迷走神経が接続する頭部の主要な神経の炎症に関連する可能性のある症状を記載した様々な有害事象の2021年における件数を集計しています。
これらの症状には、無嗅覚症（嗅覚障害）、耳鳴り、難聴、顔面神経麻痺、めまい、片頭痛、発声障害、嚥下障害、吐き気、嘔吐、呼吸困難、失神、徐脈が含まれます。COVID-19ワクチンに関連するこれらの症状の症例は全部で200,000件以上あり、2021年にこれらの症状に関連したあらゆるワクチンの症例の97.2%に相当しました[24]。
また、エクソソームが脳内のアミロイド原性タンパク質の伝播に重要な役割を果たすという証拠もある。ヒトのプリオンタンパク質であるPrPは、正常型（PrP C ）とミスフォールド型（PrP SC ）の両方でエクソソームと関連していることが判明している。
さらに、PrP SCを含むエクソソームは感染性を有している[25]。エクソソームは、アルツハイマー病に関連する2つのタンパク質であるアミロイドβとリン酸化タウの両方を輸送することができます。
アルツハイマー病に関連するAβプラークは、エクソソームタンパク質に富んでおり、エクソソームが元凶であることが示唆されている[26]。エクソソーム合成を阻害する技術は、タウオパチーのマウスモデルにおいてタウの伝播を停止させることが判明している[27]。
タウタンパク質とAβの誤折れや凝集がADの脳で見られることから、これらの異なるタンパク質にエンドサイトーシスによる普遍的な毒性システムが作用していることが示唆されています[28]。
タウ凝集を起こした細胞から特異的に得られたエクソソームは、受容体細胞において可溶性タウの種となり、腐敗させることができる[29]。
miRNAは、約22個のヌクレオチドを含む小さな一本鎖の非コードRNA分子で、動物、植物、ウイルスなど様々な生物界に存在するものである。 miRNAは、タンパク質をコードするmRNA分子の3'および5'（5'キャップ付近）非翻訳領域（3'、5'UTR）に結合することにより、特定のタンパク質に対する遺伝子の発現を抑制する能力を通じて重要な制御役割を果たす[30, 31]。
抗原提示樹状細胞（DC）とT細胞は共にエクソソームmiRNAを分泌し取り込むことができるため、エクソソームを、他のカーゴと関連して、異なる細胞タイプ間でこれらの重要な制御RNAを転送する細胞-細胞コミュニケーション機構として見ることが適切である[32]。
ここでの議論に重要なのは、miR-155とmiR-146aの2つのmiRNAである。どちらもエンドトキシンに曝された免疫細胞が放出するエクソソーム中に存在することが確認されている[32]。両者はまた、COVID-19との関連で発現レベルが変化するmiRNAの短いリストにも挙げられている[33]。 胚中心での抗原提示に続く抗体産生の過程において、エクソソームがT細胞とB細胞の間の細胞間コミュニケーションに不可欠な役割を果たすことが実験的に証明されています。
このエクソソームには3種類の特異的なmiRNA（そのうちの1つはmiR-155）が存在し、適切なB細胞応答を引き出すのに必須であることが同定されました。このmiRNAは、抗体産生プロセスに不可欠なB細胞の生存、増殖、抗体クラススイッチングを促進しました[34]。 私たちは以前、特にmiR-155がmRNAワクチンに関連する心筋炎にどのような役割を果たす可能性が高いかを示しました[18]。
ここでは、神経変性疾患の誘発におけるmiR-146aの役割について論じることにします。
脾臓の免疫細胞から放出されたエクソソームは、迷走神経を伝って脳幹核に到達し、スパイクタンパク質だけでなく、タンパク質をコードする無傷のmRNA分子も含む毒物を脳の受容細胞に運ぶという仮説が立てられます。
miR-146aは、一般的に発現しているmiRNAで、多くの疾患に関与している。miR-146aは、ROCK1 mRNAの3'UTRに結合し、タンパク質への翻訳を抑制することが知られています。キナーゼを抑制することがタウのリン酸化を増加させるというのは紛らわしいかもしれないが、ROCK1はタウに直接作用するわけではない。ROCK1がPTEN（protein phosphatase and tensin homolog）をリン酸化すると、PTENが活性化されてタウの脱リン酸化が促進されるのである。miR-46aがROCK1を抑制すると、PTENが活性化され、タウに結合したリン酸が蓄積されることになるわけだ。
ROCK1のもう一つの役割は、急性炎症時のマクロファージや好中球の過剰な動員を抑制することであり、miR-146aによるその抑制は、マクロファージや好中球の組織への過剰な浸潤をもたらし、炎症を増大させる[38]。 PogueとLukiwによるレビュー論文では、結論としてこう述べられている。「2650のメンバーからなるヒトmiRNA遺伝子ファミリーの特定の種は、脳に多く存在し、哺乳類の脳とCNSの年齢関連の内部神経障害の開始、伝播、発症に関与することを示す証拠が増えてきている。
この中には、ウイルスやプリオンによって誘発される脳症や、AD（アルツハイマー病）を含むヒト脳の進行性加齢性神経変性症に、ユニークな炎症性miRNA-146aが関与していることが明らかにされています。
ALS（筋萎縮性側索硬化症）、AMD（加齢黄斑変性症）、MS（多発性硬化症）、TLE（側頭葉てんかん）、スクレイピー、BSE（狂牛病）、CJD（クロイツフェルトヤコブ病）、GSS（ガイストマン-ストラスラー-シャインカー症候群）やクル（Kuru）などです。 "[35].。
上述したように、miR-146aはエンドトキシンに応答して発現が上昇する。スパイクタンパク質は、そのfurin切断部位のすぐ上に、黄色ブドウ球菌によって産生されるエンテロトキシンB（SEB）のセグメントと連続的かつ構造的に類似するスーパー抗原様モチーフである配列を含んでいる[39]。さらに、次のセクションで見るように、エキソソームを受け取ったミクログリアにおいて、スパイクタンパク質がmiR-146aをアップレギュレートすることが期待できる直接的なシグナル伝達経路がある。
抗原提示樹状細胞（DC）とT細胞の両方は、エキソソームmiRNAを分泌して取り込むことができるので、他の荷物と関連して、異なる細胞タイプ間でこれらの重要な制御RNAを移送する細胞-細胞コミュニケーション機構としてエキソソームを見ることが適切である [32]（The MIDORI Prize of the Year）。
ここでの議論に重要なのは、miR-155とmiR-146aの2つのmiRNAである。どちらもエンドトキシンに曝された免疫細胞が放出するエクソソーム中に存在することが確認されている[32]。両者はまた、COVID-19との関連で発現レベルが変化するmiRNAの短いリストにも挙げられている[33]。
胚中心での抗原提示に続く抗体産生の過程において、エクソソームがT細胞とB細胞の間の細胞間コミュニケーションに不可欠な役割を果たすことが実験的に証明されています。
このエクソソームには3種類の特異的なmiRNA（そのうちの1つはmiR-155）が存在し、適切なB細胞応答を引き出すのに必須であることが同定されました。miRNAは、B細胞の生存、増殖、抗体クラススイッチングを促進し、これらはすべて抗体産生過程に不可欠である[34]。 私たちは以前、特にmiR-155がmRNAワクチンに関連した筋萎縮症にどのように関与しているかを示しました[18]。ここでは、神経変性疾患の誘発におけるmiR-146aの役割について論じることにします。
脾臓の免疫細胞から放出されたエクソソームは、迷走神経を伝って脳幹核に到達し、スパイクタンパク質だけでなく、タンパク質をコードする無傷のmRNA分子も含む毒物を脳の受容細胞に運ぶと仮定しています。
miR-146aは、一般的に発現しているmiRNAで、多くの疾患に関与している。miR-146aは、ROCK1 mRNAの3'UTRに結合し、タンパク質への翻訳を抑制することが知られています。キナーゼを抑制することがタウのリン酸化を増加させるというのは紛らわしいかもしれないが、ROCK1はタウに直接作用するわけではない。ROCK1がPTEN（protein phosphatase and tensin homolog）をリン酸化すると、PTENが活性化されてタウの脱リン酸化が促進されるのである。
miR-46aがROCK1を抑制すると、PTENが活性化され、タウに結合したリン酸が蓄積されることになるわけだ。ROCK1のもう一つの役割は、急性炎症時のマクロファージや好中球の過剰な動員を抑制することであり、miR-146aによるその抑制は、マクロファージや好中球の組織への過剰な浸潤をもたらし、炎症を増大させる[38]。
PogueとLukiwによるレビュー論文では、結論としてこう述べられている。「2650のメンバーからなるヒトmiRNA遺伝子ファミリーの特定の種は、脳に多く存在し、哺乳類の脳とCNSの年齢関連の内部神経障害の開始、伝播、発症に関与することを示す証拠が増えてきている。この中には、ウイルスやプリオンによって誘発される脳症や、AD（アルツハイマー病）を含むヒト脳の進行性加齢性神経変性症に、ユニークな炎症性miRNA-146aが関与していることが明らかにされています。
ALS（筋萎縮性側索硬化症）、AMD（加齢黄斑変性症）、MS（多発性硬化症）、TLE（側頭葉てんかん）、スクレイピー、BSE（狂牛病）、CJD（クロイツフェルトヤコブ病）、GSS（ガイストマン-ストラスラー-シャインカー症候群）やクル（Kuru）などです。 "[35]. 上述したように、miR-146aはエンドトキシンに応答して発現が上昇する。スパイクタンパク質は、そのfurin切断部位のすぐ上に、黄色ブドウ球菌によって産生されるエンテロトキシンB（SEB）のセグメントと連続的かつ構造的に類似するスーパー抗原様モチーフである配列を含んでいる[39]。
さらに、次のセクションで見るように、エキソソームを受け取ったミクログリアにおいて、スパイクタンパク質がmiR-146aをアップレギュレートすることが期待できる直接的なシグナル伝達経路が存在する。
以前の論文で、我々は、mRNAワクチンの主な効果は、I型インターフェロンシグナルを阻害することであり、潜在的なウイルスの活性化や癌に対する感受性を高めることにつながると提案しました[24]。
miR-146aの過剰発現は、このダウンレギュレーションの重要な寄与因子である可能性があります。miR-146aは、IFNシグナルの重要なメディエーターであるInterferon Regulatory Factor 5 (IRF-5), Signal Transducer and Activator of Transcription 1 (STAT1) Interleukin-1 Re- ceptor-Associated Kinase 1 (IRAK-1) およびTNF Receptor Associated Factor 6 (TRAF6) の合成抑制を介して、タイプIインターフェロンのシグナルを抑制することがわかっている[40]。
CD16+単球とToll Like Receptor 4
SARS-CoV-2に感染した患者の30％は、ウイルスが消失した後も衰弱した症状を経験し続ける。この症状は、俗に「ロングCOVID」（訳注：コロナ後遺症）と呼ばれ、正式には「Post-acute sequelae of COVID」（PASC）と呼ばれる。一般的な症状としては、息切れ、疲労、ブレインフォグ、炎症、凝固異常などがあります。
PASCに罹患した46人の患者を対象とした研究では、急性感染から15ヵ月後までのPASC患者では、2つの特異的な非古典的単球型、（CD14Lo、CD16+）と（CD14+、CD16+）が有意に増加することが判明しました。
これらの非典型的な単球の統計的に有意な数は、感染後15ヶ月まで、SARS-CoV-2 S1タンパク質を含んでいることが判明した[41]。
続いて行われたプレプリント研究では、COVID-19のワクチン接種後にPASC様症状を経験した個人を対象としました。これらの患者のうち6人からCD16+単球が分離され、彼らもまたS1およびS2配列、ならびにいくつかの変異S1ペプチドを含んでいることが確認された[42]。
これらの単球からスパイク蛋白の断片が継続的に放出されることによって、PASCの症状が持続している可能性が提唱された。
これらの単球がmRNAをDNAに逆転写し、プラスミドに保存している可能性がある。
再トロトランスポゾンであるLong interspersed nuclear element-1（LINE-1）を発現しているヒト細胞は、トランスフェクションによって曝露後6時間以内にスパイクタンパク質のmRNAをDNAに逆転写できることが実験的に示されている[43]。
すべてのレトロウイルスに存在するGagポリタンパク質は、逆転写と宿主DNAへの統合に向けた重要なステップとして、ビリオンの組み立ての多くの側面を調整する必須の核酸結合タンパク質である[44]。2020年に発表された、挑発的なタイトルの論文。
「Prion protein PrP nucleic acid binding and mobilization impli-cates retroelements as the replicative component of transmissible spongiform encephalo-pathy" という挑発的なタイトルで発表された論文は、PrPが核酸結合性抗菌タンパク質で、レトロウイルスGagタンパク質と同様にLINE-1レトロエメント由来のRNAに結合して逆転写を誘発できることを提唱している。
さらに、彼らは、PrP SCの細胞毒性はLINE-1レトロトランスポジション活性を促進する能力に依存していると主張した[45]。
これはDNAの二本鎖切断と細胞損傷をもたらすが、同様に、PrP SC、そして、RNA結合タンパク質でもあるスパイクタンパク質自体も、LINE-1を介したスパイクタンパク質mRNAのDNAへの再転写を促進すると推察される。
LINE-1はほとんどの細胞で不活性であるが、癌細胞や免疫細胞のように神経細胞はLINE-1を活発に発現し、特に神経変性疾患と関連している [46,47] 。これらすべての潜在的な意味合いは、悲痛なものである。 血液中のフィブリノーゲンは、他のβリッチアミロイドやプリオンと同様に、タンパク質分解（fi-brinolysis）に対して比較的抵抗性のある異常なアミロイド形態のフィブリンに凝固することが可能である。
DB Kellらの論文では、SARS-CoV-2スパイクタンパク質がフィブリンと相互作用して、フィブリナロイドと呼ばれる異常なアミロイドフィブリン微小塊を形成することができるという証拠が示されている。
これらの微小塊は、赤血球の毛細血管への輸送を阻害し、感染した組織への酸素の供給を阻害することができる。彼らは、スパイク蛋白のこの特徴が、PASCの主要な根本的病因である可能性を論じた[48]。
別の研究において、スパイクプロテインを全血に添加すると、血小板の過活性化と異常なアミロイド様血栓と高密度の血栓沈着を伴う凝固亢進を誘発した [49]。
このことは、プリオン様タンパク質が脳内でタンパク質のミスフォールディングを引き起こし、神経変性疾患を引き起こすことを強く連想させ、その根底にある生物物理学的側面は類似していると思われる。
血液単球は、toll like receptor 4 (TLR4)経路を通じて、グラム陰性菌が産生するエンドトキシンを認識する[50]。TLR4経路は、骨髄分化因子88（MyD88）を介して、腫瘍壊死因子α（TNF-α）およびインターロイキン-1β（Il-1β）のmRNAおよびタンパク質レベルの両方をアップレギュレートすることにより、炎症反応を誘導する [51]．ブドウ球菌の超抗原であるエンテロトキシンB（SEB）は、TNF-αの強力な誘導剤であり、（CD14Lo、CD16+）単球の大きな膨張を刺激する。全血培養にリコンビナントTNF-αを添加すると、（CD14Lo, CD16+）単球集団が全単球プールの35%まで拡大した[52]。
注目すべきは、SARS- CoV-2のスパイクタンパク質には、Furin切断部位のすぐ上にSEBと酷似した配列があることである。この配列は、オリジナルのSARS-CoVには存在しない[39]。
図1は、スパイクタンパク質によるTLR4シグナル伝達反応の活性化と、神経細胞におけるmiR-146aのアップレギュレーションに関与する経路を図式化したものである。
SARS-CoV-2スパイクタンパク質がTLR4に結合し、それを活性化することは、慎重に行われた実験により確信を持って証明されている。
スパイクタンパク質は、300nMの親和性でTLR4受容体に直接結合し、これは多くのウイルスと受容体の相互作用の結合強度に匹敵するものである。さらに、スパイクタンパク質は炎症物質であるIl-1βを強力に誘導し、この誘導はTLR4阻害剤を加えると失われる[53]。
SEBに類似したセグメントがTLR4の活性化に関与していることが考えられる。
米国コロラド州ボルダーの研究チームは、スパイクタンパク質のS1サブユニットに着目し、S1セグメントを成体オス Sprague-Dawley ラットの大槽に注入すると、行動障害、ミクログリア活性化、神経炎症反応が起こることを実証している。彼らは、S1が病原体関連分子パターン（PAMP）を介してシグナルを発していることを突き止めた。
トランスジェニックTLR4 HEK293細胞を用いたin vitroの実験では、S1がTLR4受容体に結合し、TNF-αや他の炎症性サイトカインのアップレギュレーションを誘導することが示された [54] 。 パーキンソン病におけるTLR4の役割を支持する証拠が増えつつある [55]。TLR4の発現は、炎症性サイトカインIL-1βのアップレギュレーションとともに、パーキンソン病と関連して黒質で高値である[56]。パーキンソン病患者は、循環単球およびB細胞におけるTLR4の発現も亢進している[57]。 重度のCOVIDの症状は、敗血症と多くの特徴を共有している [58] 。
CD16+単球サブセットは、敗血症患者で拡大し、CD16+単球の炎症反応の調節異常は、敗血症と関連している [50]。敗血症患者は、血中のCD16+単球のレベルが高く、これは、炎症性ケミカインIl-6の上昇と関連している[59]。 （CD14+, CD16+）単球は、他の単球に比べて炎症性サイトカインの発現量が多く、抗原提示能力が高いことが認識されており、そのため、感染や炎症において重要な役割を担っている[60]。
AIDS認知症患者を対象とした研究では、血液中の単球のうち（CD14+, CD16+）細胞の割合が、HIV陰性対照者のわずか6.5%に比べて極めて高い（平均37%）ことが明らかにされた。この著者らは、これらの細胞が「脳に入り込み、神経細胞を毒性因子にさらすかもしれない」と要旨に書いている[61]。 [61].
異常に高いレベルの（CD14+、CD16+）単球は、サル・コイドーシス [62] と複合領域疼痛症候群（神経遺伝子炎症に関連した状態） [63] とも関連している。
エイズウイルスであるHIVは、中枢神経系に侵入し、そこで認知障害をもたらす神経性炎症を引き起こします。
2017年に発表された研究では、HIVによって誘導されたTNF-αの発現が、脳内のアストロサイトからのPrPの脱落につながることが示されました。
認知の問題に悩むAIDS患者の脳脊髄液中のPrPのレベルは、認知の問題のないAIDS患者と比較して上昇していました[64]。
スパイクタンパク質のS2セグメントは、ウイルス膜と細胞膜の膜融合を担っている。S2タンパク質とHIV-1のgp41タンパク質の立体構造の研究から、この2つのタンパク質は同じ2つのαヘリックスを共有しており、類似の膜融合メカニズムに従う可能性があることが明らかになりました[65]。
スパイク蛋白がTNF-αの急激な上昇を誘導し、認知障害を引き起こすという事実は、HIVと同様に脳内のPrP発現を上昇制御している可能性を示唆している。
プリオンタンパク質の主な機能は不明であるが、神経細胞のストレス条件下では保護的であることが示されている。脳卒中患者の血漿中ではPrPの発現が増加し、神経細胞をアポトーシスから保護している[66]。また、PrPは酸化ストレス条件下で細胞を老化から保護するという証拠もある。銅硫化物とのインキュベーションにより培養した線維芽細胞の老化を抑制すると、PrP mRNAレベルの増加、PrPタンパク質存在量の増加、PrPの核局在化が見られた。
PrPの発現をsmall interfering RNAでノックダウンすると、老化のマーカーが増加した。これらの知見から、PrPは酸化ストレス条件下で発現が上昇し、老化の変質を遅らせる抗酸化物質として役立つという結論に達した[67]。
スパイクタンパク質は、トランスフェクトされた細胞において老化を誘導することが実験的に示されている[68]。高分子の混雑は、ネイティブなPrPの神経毒性を持つ可溶性βオリゴマーへの変換を促進することができ、トランスフェクトされた免疫細胞におけるmRNAからのスパイクタンパク質の急速な生産は、混雑環境を誘発すると同時に、ストレス環境によるPrP合成のアップレギュレーションも考えられる[69]。
これはPrP SC分子の形成に理想的な環境であり、脾臓やその他の場所でトランスフェクトされた免疫細胞からエクソソーム内に放出されるであろう。
PrP Cから感染性PrP SC分子への変換は、PrP SCが存在しない場合には極めて遅いプロセスである。しかし、中間体PrPの影響下では、PrP SCは鋳型援助モデルによって強固で不可逆的なアミロイド生成を誘導することができる。
別のモデルでは、PrP SCが存在し、PrP Cと相互作用する場合、アミロイド生成への進行は速く、可逆的であり（核重合モデル）、神経毒性を確立する [70,71].
Hsp70と糖尿病の役割
複数の研究により、糖尿病および／または肥満に苦しむ人々は、COVID-19による重篤な転帰のリスクが高いことが示されている［72,73］。
この観察に対する一つの可能な説明は、これらの条件が、通常炎症反応の解消につながる発熱に対する自然な反応である熱ショック反応（HSR）を乱すことである[74-76]。
実際、高リスクのCOVID-19患者では、抗炎症性の熱ショック応答が抑制されている［77］。熱ショック伝達因子1（HSF1）は、熱ショックタンパク質の発現を制御する主要な転写因子である。Il-6とIl-1βの活性を抑制し、炎症反応をおさえる[78]。
組織損傷や生命を脅かす多臓器不全を引き起こすのは、しばしば過剰な免疫系による過剰なサイトカイン産生である[79]。 通常、HSRは、Hsp72およびHspa1aとしても知られる誘導性熱ショックタンパク質70（Hsp70）、代謝および調節過程における多くの複雑な役割を持つ分子シャペロンの発現を誘導する。
熱ショックタンパク質は、HSRによる活性化後の細胞において、全タンパク質量の最大2%を占めることがある[80]。Hsp70/72は、タンパク質のフォールディングプロセスにおいて、他の多くのタンパク質と相互作用してフォールディングを促進し、タンパク質凝集体の形成から保護し、損傷したプロテイーンの分解を促進する [81]。
ストレス性の刺激は、細胞内の熱ショックタンパク質を細胞外環境および循環系に放出するよう誘導することができる。
細胞外のHsp70/72は、抗原に対する適応免疫応答を促進する役割を担っている[82] [60]。また、細胞外のHsp70/72は抗原と結合することができ、その複合体はスカベンジャー受容体を介して抗原提示細胞（APC）に認識される。複合体はAPCに取り込まれ、結合したHsp70/72がプロテアソームへ到達するまで抗原を保護する。
抗原は処理後、MHCクラスI分子に輸送され、細胞傷害性CD8+T細胞の活性化を引き起こす。Hsp70/72-抗原複合体は、ライソゾームで処理され、MHCクラスII分子上の抗原由来ペプチドの提示につながり、CD4+T細胞を活性化することもできる[83,84]。
インスリンシグナル伝達の障害は、HSRを誘導する能力の欠如と炎症の亜急解をもたらす。グリコーゲン合成酵素キナーゼ3（GSK-3）は、多くの疾患の分子病態生理に重要な役割を果たすセリン／スレオナインキナーゼである。その過剰発現は、インスリン抵抗性に関連している[85]。
GSK-3はHSF1のDNA結合活性と転写活性の両方を負に制御している[86]。TNF-α遺伝子のプロモーター領域にはHSF1の結合部位があり、TNF-αの転写を抑制している。したがって、インスリン抵抗性の人は、HSF1の発現を誘導する能力が低下している結果として、エンドトキシンへの曝露に対する感受性が増加する[87]。
Hsp70の最も重要な機能の1つは、神経変性疾患から保護することである。Hsp70は、適切なフォールディングを促進し、フィブリル形成を遅らせることにより、様々なタンパク質のミスフォールディングによる神経疾患からの保護と関連付ける論文が研究文献に多数存在する[88-90]。
in vitroの研究からの証拠も非常に明確である。 プリオンに慢性的に感染した細胞でHsp70を薬理学的に誘導すると、PrP SCの蓄積が有意に減少した。
さらに、Hsp70の遺伝子を欠損したマウスは、野生型マウスと比較してプリオン病の進行が加速された[90]。
脾臓の胚中心にある免疫細胞は、mRNAワクチンのmRNAの指示でスパイクタンパク質を常に合成しているため、過剰なタンパク質負荷とスパイクタンパク質断片がアミロイド生成型にミスフォールドする可能性により、かなりのストレスを受けていると思われます。
発熱はワクチンに対する非常に一般的な副反応で、熱ショック反応の活性化を示しています。 脾臓の免疫細胞は、HSF1の影響を受けてHsp70をアップレギュレートし、スパイクタンパク質や、スパイクに対する適切な抗体反応を引き起こすのに必要なmiR-155やmiR-146aなどのmiRNAとともに、エクソソームに放出すると予想される。
エクソソームは、プリオンの新規かつ効率的な伝達方法である。
エクソソーム放出を刺激するとプリオンタンパク質の細胞間移行が増加し、逆にエクソソーム放出を薬学的に阻害するとプリオンの移行効率が低下する[91]。
ワクチン接種を受けた肥満や糖尿病の人は、熱ショック反応を起こす能力が低下し、スパイクタンパク質を含むエクソソームを取り込んだ細胞は、スパイクタンパク質のミスフォールディングから守られなくなるであろう。
G4重鎖の潜在的な役割
ワクチンのスパイクタンパク質とウイルスによって合成されたタンパク質を比較する際に考慮すべき点は、ワクチン用のmRNAを特定する際の「コドン最適化」のステップに関連している。
これは、ほとんどのアミノ酸のヌクレオチドコードが冗長であることを利用したもので、ウイルスが使用するコドンを、タンパク質の組み立てに効率的なものに置き換えるというものである。
その結果、最も効率的なコドンは、他のコドンよりも平均してグアニンを多く含んでいることがわかった。 グアニンヌクレオチドは、ヌクレオチド配列に豊富に含まれる場合、「G四重鎖」（G4）と呼ばれる特殊な構造に構成されることがある[24]。
G4は、あまり理解されていない方法で翻訳を制御する可能性があるため、近年話題になっている[92]。
さらに、ヒトプリオンタンパク質のmRNAには複数のG4形成モチーフが存在することが明らかになり、G4はプリオンタンパク質がミスフォールドした状態になるために重要な役割を担っているという仮説が立てられている[93]。
ウイルス版のスパイクタンパク質mRNAの元のヌクレオチド配列は、4つのG4モチーフを形成する可能性しかないが、ファイザー版は9つ、モデナ版は19のG4モチーフを形成する可能性を持っている[94]。
2014年に発表された論文の著者は、"G-quadruplexes within prion mRNA: the missing link in prion disease?" という適切なタイトルのもと、結論として次のように書いている：''PrP mRNAにG4形成モチーフが存在することは、PrP CからPrP SCへの最初の変換においてミッシングリンクを提供する可能性がある”。
PrPのmRNAのG4形成モチーフの存在は、プリオンがプリオン病になる際の最初の変換に関与していると考えられる。
mRNAの構造がどのようにPrP Cやおそらくプリオン様特性を持つ他の多くのRNA結合タンパク質の（誤った）折り畳みに関与しているかを理解することは、CJDや関連疾患のより良い治療法を開発するために最も重要である。" [93]。
おわりに
本稿では、SARS-CoV-2スパイク糖タンパク質が神経毒であり、mRNAワクチンが脾臓から放出されるエクソソームを介してスパイクタンパク質を脳に送達し、神経変性疾患のリスクを増大させる可能性があるという証拠を、幅広い研究文献から検証してきた。
図2は、三角筋への注射から始まる神経変性につながる可能性の高い一連の事象の模式図である。 特に興味深いのは、CD16+単球がワクチン接種後数ヶ月にわたって、おそらくmRNAのDNAへの逆転写を通じて、スパイクタンパク質を継続的に産生することが証明されている点である。
ワクチン接種によって誘導された抗体は時間とともに弱くなることが明らかになっており、COVID-19から十分に保護するためには、抗体レベルを上げるために頻繁にブースターを接種する必要がある。
ブースター接種のたびに、将来、神経変性疾患を引き起こすリスクが高まる。
しかし、もし理論的な解析が正しければ、現在のオミクロンの変異体はプリオン様能力が大幅に低下しており、その結果、病原性が低下していることが確認された。 （訳注：オミクロン１価ワクチンならリスクは低いが、２価ワクチンが使用されている）
Lancet誌に掲載された研究では、COVID-19ワクチンの有効性を長期にわたって追跡調査している。その結果、2回接種シリーズの2回目の接種から8カ月が経過すると、免疫機能はワクチン未接種者よりも低下していることが示された[95]。
ブースターは一時的に高い抗体レベルを回復させることができるが、頻繁なブースターは、無期限に、自然免疫機能をさらに低下させ、さまざまな感染症やがんのリスクを増大させる可能性がある。
さらに、ウイルスの急速な進化により、現在主流となっている株のスパイクタンパク質に対する抗体の結合が弱まりつつあります。
幸いなことに、現在のウイルスの株は、オリジナルの株よりもウイルス量が少ないようです。これは、プリオンのようなミスフォールディングの可能性が減少した結果かもしれない。 これらのことを考慮すると、mRNAワクチンのリスクとベネフィットの比率を再評価する必要がある。
ワクチンを接種するたびに、スパイクタンパク質が大量に放出され、アミロイド形成の可能性をさらに高め、将来の神経変性疾患のリスクを増大させます。
BMC誌に掲載された山本賢二氏（訳注：岡村記念病院 下肢静脈瘤センター長）のコメントでは、医療界に対し、病院患者に対する最新のワクチン接種日を記録し、ワクチンがどのような役割を果たしたかを評価できるようにするよう求めている。
彼はまた、COVID-19による死亡の危険性が最も高い患者以外への継続的なブーストを促進する政策を強く非難している[96]。
政府は、ワクチンブースターを繰り返すことがCOVID-19に対処する有効なアプローチであるとする盲目的な政策を再考することが急務である。
翻訳ここまで。
山本賢二博士についての参考記事。
概要
最近，Lancet誌にCOVID-19ワクチンの有効性と経時的な免疫力の低下に関する研究が掲載された。
この研究では，COVID-19ワクチン2回接種後8カ月経過した接種者の免疫機能は，未接種者に比べて低下していることが示された。欧州医薬品庁の勧告によると、COVID-19のブースターショットを頻繁に行うと、免疫反応に悪影響を及ぼす可能性があり、実行できない可能性があります。
免疫力の低下は、N1-methylpseudouri-dine、スパイクタンパク質、脂質ナノ粒子、抗体依存性増強、元の抗原刺激などいくつかの要因によって引き起こされる可能性がある。
これらの臨床的変化は，COVID-19ワクチン接種と帯状疱疹との間に報告された関連性を説明する可能性がある。
安全対策として，今後のブースターワクチン接種は中止すべきである。
また，患者のカルテに接種日を記録しておく必要がある。免疫力低下を防ぐための実際的な対策がいくつか報告されています。
深部体温を維持するためのアセトアミノフェンを含む非ステロイド性抗炎症薬の使用制限，抗生物質の適正使用，禁煙，ストレスコントロール，周術期の免疫抑制を引き起こす可能性のあるプロポフォールを含む脂質乳化剤の使用制限などである。
以上より，COVID-19のワクチン接種が重症患者における感染症の大きなリスクファクターであることが示された。
参考情報
以上